下丘脑弓状核Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响

Abstract

目的: 探讨下丘脑弓状核(arcuate nucleus, ARC)注射Ghrelin对糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis, DGP)大鼠胃运动的调控作用.

方法: 240只Wistar大鼠按数字表法随机分为10个大组(每组24只): 对照组(C)、生理盐水组(NS)、Ghrelin低剂量组(L)、Ghrelin高剂量组(H)、高剂量Ghrelin合并D-Lys3-GHRP-6(DLS)组(H+D)、糖尿病胃轻瘫大鼠组(DGP)、生理盐水DGP组(DGP+NS)、Ghrelin低剂量DGP组(DGP+L)、Ghrelin高剂量DGP组(DGP+H)和高剂量Ghrelin合并D-Lys3-GHRP-6 DGP组(DGP+H+D). 采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型; 荧光免疫组织化学染色方法观察糖尿病大鼠下丘脑ARC中Ghrelin受体(GHS-R)表达变化; 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(real-time PCR)进一步检测GHS-R mRNA在糖尿病大鼠ARC中表达变化; 采用在体胃运动记录方法, 观察下丘脑ARC注射Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响.

结果: 在DGP大鼠ARC中GHS-R免疫阳性细胞数(10.0/mm²±2.1/mm²)和mRNA相对含量(GHS-R1a/β-actin: 0.48±0.13)与正常大鼠(3.0/mm²±0.7/mm², 0.21±0.10)比较均显著降低(P<0.05). 正常清醒大鼠胃运动幅度为8.14 g±1.58 g, 频率为5.18/min±0.61/min. 下丘脑ARC微量注射0.05 nmol和0.5 nmol Ghrelin, 胃运动幅度呈量效依赖性增加(L: 14.6 g±2.2 g vs NS: 8.14 g±1.58 g, P<0.05; H: 22.28 g±4.10 g vs NS: 8.14 g±1.58 g, P<0.01, vs L: 14.6 g±2.2 g, P<0.05), 胃收缩频率明显加快(L: 7.45/min±0.87/min vs NS: 5.18/min±0.61/min, P<0.05; H: 10.98/min±1.03/min vs NS: 5.18/min±0.61/min, P<0.01; vs L: 7.45/min±0.87/min, P<0.05). DGP大鼠胃运动幅度明显下降(2.21 g±0.89 g vs 8.14 g±1.58 g, P<0.05), 收缩频率明显降低(1.81/min±0.23/min vs 5.18/min±0.61/min, P<0.05). 下丘脑ARC微量注射0.5 nmol Ghrelin, DGP大鼠胃运动幅度显著增加(5.04 g±1.11 g vs 2.14 g±0.23 g, P<0.05), 收缩频率明显加快(3.81/min±0.43/min vs 1.80/min±0.19/min, P<0.05). GHS-R阻断剂D-Lys3-GHRP-6可完全阻断Ghrelin此作用.

结论: 糖尿病大鼠胃运动障碍可能与下丘脑GHS-R表达减少有关; Ghrelin在ARC参与糖尿病大鼠胃轻瘫的调控, 该作用可能通过GHS-R实现.

Keywords: 下丘脑弓状核; Ghrelin; 糖尿病胃轻瘫; 胃运动