基础研究
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世界华人消化杂志. 2012-09-28; 20(27): 2562-2569
Published online 2012-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v20.i27.2562
二乙基亚硝胺诱发肝癌前病变大鼠模型的建立
宋艺君, 刘晓婷, 冯丽莉, 王湘, 白荟芳, 田民强, 张微, 祖承哲, 赵欣, 蔡大勇, 王玥琦
宋艺君, 刘晓婷, 冯丽莉, 王湘, 白荟芳, 田民强, 张微, 王玥琦, 北京中医药大学基础医学院 北京市 100029
祖承哲, 赵欣, 蔡大勇, 中国医学科学院药用植物研究所 北京市 100193
宋艺君, 在读博士, 主要从事中药防治常见病的研究.
基金项目: 重大新药创制科技重大专项基金资助项目, No. 2009ZX09502-017; 教育部重点研究基金资助项目, No. 108019; 北京中医药大学创新团队基金资助项目, No. 2011-CXD-04.
作者贡献分布: 课题由王玥琦与蔡大勇设计; 研究过程由宋艺君、刘晓婷、冯丽莉、王湘、白荟芳、田民强及张微操作完成; 数据分析由宋艺君、祖承哲及赵欣完成; 本论文写作由宋艺君完成.
通讯作者: 王玥琦, 教授, 100029, 北京市朝阳区北三环东路11号, 北京中医药大学基础医学院. yueqiwng@gmail.com
电话: 010-64286851
收稿日期: 2012-07-08
修回日期: 2012-08-21
接受日期: 2012-09-03
在线出版日期: 2012-09-28
Abstract

目的: 以异型性指数, 界定二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌前病变的时效关系与量效关系.

方法: Wistar♂大鼠100只, 体质量均衡随机分5组; 每84 h 1次分别腹腔注射二乙基亚硝胺0、25、50、75、100 mg/kg造模. 每组体质量排序分10小组, 年龄配对; 造模时程最短0 d, 间隔14 d延长, 最长126 d, 灌注固定肝脏. 常规石蜡包埋, 6 μm切片, HE染色, 观察病变性质后显微照相; 使用Image-Pro Plus软件, 分别形态计量10、20、40倍物镜下汇管区(R1)、肝索(R2)、肝细胞核(R3)的体积构成比, 观察每10个高倍镜视野下的核分裂像; 计算各动物异型性指数[Ei = (1-R1)-1•(R3)•(R2)-1]. Prism 4软件回归"二乙基亚硝胺导致异型性指数"的时效曲线及曲线下面积, 进而导致曲线下面积的量效关系.

结果: 以异型性指数(肝细胞核/浆体积比校正值), 回归0、25、50、75、100 mg/kg二乙基亚硝胺造模的半效时程(95%CI)分别为70 347(0-)、1 734(937-3 211)、1 536(948-2 490)、1 530(890-2 632)、1 183(955-1 466)h, 曲线下面积分别为0.0064、0.0084、0.0123、0.0165、0.0167[异型性指数•log(h)]. 以曲线下面积, 回归二乙基亚硝胺诱发肝细胞癌前病变的半效剂量为48.255 mg/kg. 50.000 mg/kg造模各时程的异型性指数与核分裂像总数之间呈直线正相关(y = 0.0023x-0.0056,  r = 0.9217, n = 10, P<0.01).

结论: 以异型性指数为指标, 每84 h腹腔注射1次二乙基亚硝胺, 诱发♂大鼠肝细胞癌前病变的最佳造模剂量为48.255 mg/kg(约50.000 mg/kg), 最佳造模累积连续时程为64 d. 核分裂像计数验证了异型性指数的临床预警价值.

Keywords: 二乙基亚硝胺; 肝癌前病变; 异型性指数; 核分裂像; 形态计量