基础研究
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世界华人消化杂志. 2012-09-08; 20(25): 2341-2346
Published online 2012-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i25.2341
FUT3-miRNA重组质粒对人胃癌KATO-III细胞增殖的影响
辛永红, 郏雁飞, 蔡永君, 刘强, 汪运山
辛永红, 蔡永君, 泰山医学院临床学院 济南市第四人民医院输血科 山东省济南市 250031
郏雁飞, 汪运山, 山东大学附属济南市中心医院医学实验诊断中心 山东省肿瘤防治靶向分子研究重点实验室 山东省济南市 250013
刘强, 中国重汽集团医院 山东省济南市 250031
辛永红, 硕士, 副主任技师, 主要从事肿瘤免疫及血液免疫学研究.
基金项目: 济南市科技局科技计划基金资助项目, No. 200705086-2; 济南市卫生局科技发展计划基金资助项目, No. 2007-17.
作者贡献分布: 本课题由辛永红、郏雁飞及汪运山设计; 研究过程由汪运山指导, 辛永红、郏雁飞、蔡永君及刘强操作完成; 论文写作、数据分析由辛永红与郏雁飞完成.
通讯作者: 汪运山, 教授, 博士生导师, 250013, 山东省济南市解放路105号, 山东大学附属济南市中心医院医学实验诊断中心. sdjnwys@163.com
电话: 0531-85695368
收稿日期: 2012-05-26
修回日期: 2012-08-02
接受日期: 2012-08-11
在线出版日期: 2012-09-08
Abstract

目的: 研究利用miRNA干扰技术抑制FUT3基因表达对人胃癌KATO-Ⅲ细胞增殖的影响.

方法: 将前期实验构建成功的2对针对FUT3基因的特异性miRNA表达载体, 用脂质体转染入人胃癌KATO-Ⅲ细胞, RT-PCR检测FUT3基因表达水平的变化; 免疫细胞化学法、流式细胞术检测其合成抗原sLeA表达变化; MTT法、克隆形成实验检测FUT3基因的表达抑制对KATO-Ⅲ细胞增殖的影响.

结果: 转染FUT3-miRNA的2个干扰组FUT3基因mRNA相对表达量分别为0.41±0.01, 0.36±0.02, 明显低于对照组(0.71±0.05)和空载体组(0.65±0.03, P<0.05); 细胞表面合成抗原sLeA的表达水平, FUT3-miRNA1组为35.51%±0.36%, FUT3-miRNA2组为26.05%±1.14%, 明显低于对照组(52.79%±2.62%)与空载体组(49.75%±1.29%, P<0.05); 与对照组(5.60%±0.63%)和空载体组(8.90%±0.91%)相比较, FUT3-miRNA1组(38.10%±1.96%)和FUT3-miRNA2组(49.04%±2.37%)能明显抑制细胞的增殖(P<0.05); 细胞的克隆形成能力FUT3-miRNA1组(14.10%±1.70%)和FUT3-miRNA2组(12.50%±1.96%), 显著低于对照组(29.79%±3.05%)和空载体组(28.92%±2.10%, P<0.05).

结论: FUT3靶向miRNA真核表达载体可有效抑制胃癌细胞的增殖能力.

Keywords: FUT3基因; miRNA; RNA干扰; 胃肿瘤; 增殖