临床研究
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世界华人消化杂志. 2012-08-18; 20(23): 2151-2156
Published online 2012-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v20.i23.2151
Oncoprotein 18在肝癌侵袭转移过程中的作用
甘淋, 段承刚, 龚舒, 郭坤, 舒宏, 刘银坤
甘淋, 段承刚, 龚舒, 泸州医学院医学基础研究中心 四川省泸州市 646000
郭坤, 舒宏, 刘银坤, 复旦大学中山医院肝癌研究所 上海市 200032
甘淋, 博士, 副教授, 主要从事肿瘤分子机制的研究
基金项目: 国家重大专项基金资助项目, No. 2008ZX10002-021.
作者贡献分布: 此课题由郭坤与甘淋设计; 研究过程由甘淋、段承刚及龚舒完成; 研究所用试剂及经费由刘银坤提供; 数据分析由舒宏完成; 本论文写作由甘淋完成.
通讯作者: 刘银坤, 教授, 200032, 上海市枫林路180号, 复旦大学中山医院肝癌研究所. liu.yinkun@zs-hospital.sh.cn
电话: 021-54237962
收稿日期: 2012-05-03
修回日期: 2012-06-03
接受日期: 2012-08-07
在线出版日期: 2012-08-18
Abstract

目的: 探讨原癌蛋白18(Oncoprotein 18, Op18)在肝癌侵袭转移过程中的作用机制.

方法: 采用RNA干扰, 抑制人肝癌细胞HCCLM3中Op18的表达, RT-PCR和Western blot评价干扰效率; 通过细胞粘附分析、体外Transwell分析法检测Op18表达缺失后对HCCLM3细胞粘附、运动和侵袭能力的改变; RT-PCR和免疫组织化学分别在48例未伴转移的肝癌组织和48例伴转移的肝癌组织中解析Op18表达与肝癌侵袭转移的关系.

结果: RT-PCR和Western blot结果显示: 在HCCLM3细胞中行RNAi后Op18表达被有效抑制, 抑制率达到80%以上; Op18表达缺失后, 在不同时间点(20、40和60 min)实验组细胞粘附能力(0.616±0.057、0.740±0.0713和1.001±0.083)较阴性对照组(0.944±0.068、1.196±0.115和1.441±0.053)明显下降(P<0.05); Transwell实验结果提示: 经RNAi后实验组细胞运动、侵袭能力(运动: 0.145±0.011, 侵袭0.127±0.008)较阴性对照组(运动: 0.206±0.008, 侵袭: 0.168±0.012)显著降低(P<0.01); 分别在伴转移和未伴转移的肝癌组织中检测Op18的表达, RT-PCR(Op18与GAPDH相对比值: 0.560±0.128 vs 0.414±0.086)和IHC(积分吸光度值为: 624.771±100.032 vs 413.786±71.833)实验结果均提示Op18在伴转移的肝癌组织中的表达更高(P<0.01).

结论: Op18在肝癌的侵袭转移过程中发挥重要作用.

Keywords: 肝细胞癌; 原癌蛋白18; RNA干扰; 侵袭