临床经验
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世界华人消化杂志. 2012-07-18; 20(20): 1900-1905
Published online 2012-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v20.i20.1900
WCX磁珠联合MALDI-TOF-MS技术在结直肠癌诊断中的应用
王秀丽, 高春芳, 范乃军
王秀丽, 高春芳, 范乃军, 中国人民解放军第150中心医院全军肛肠外科研究所 河南省洛阳市 471000
王秀丽, 副主任技师, 主要从事细胞分子生物学以及消化系肿瘤的早期诊断研究.
作者贡献分布: 王秀丽与范乃军对此文所作贡献均等; 此课题由高春芳设计; 研究过程和数据分析由王秀丽与范乃军完成; 本论文写作由王秀丽与范乃军完成.
通讯作者: 高春芳, 教授, 471000, 河南省洛阳市涧西区华夏西路2号, 中国人民解放军第150中心医院全军肛肠外科研究所. chunfanggao@126.com
电话: 0379-64169372
收稿日期: 2012-04-09
修回日期: 2012-05-11
接受日期: 2012-06-01
在线出版日期: 2012-07-18
Abstract

目的: 比较结直肠癌与正常人血清蛋白质谱的变化, 筛选特异性蛋白标志物, 建立结直肠癌诊断分类树模型.

方法: 收集血清样本133例(其中结直肠癌67例, 正常人66例), 随机分为建模组和验证组. 运用弱阳离子纳米磁珠(magnetic bead-weak cation exchange, MB-WCX)联合基质辅助激光解吸离子飞行质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS), 建立结直肠癌与正常人血清蛋白质谱. 用Flex Analysis 2.4软件收集数据, 应用ClinproTools 2.2软件对建模组34例结直肠癌和33例正常人血清差异蛋白质谱进行定量分析, 应用Genetic Algorithm算法建立结直肠癌诊断模型, 应用所获取的诊断模型对验证组样本(33例结直肠癌和33例正常人)进行分类诊断, 以评价诊断模型的诊断价值.

结果: 通过比较分析结直肠癌与正常人血清蛋白质谱, 发现共有33个差异蛋白峰(P<0.05), 其中在结直肠癌中表达上调25个, 表达下调8个. 利用其中5个差异峰(Mr分别为759, 3 316, 4 645, 4 248, 2 645 Dr)建立诊断模型, 获得了94.12%(32/34)敏感性和96.97%(32/33)的特异性, 经独立样本双盲验证, 其灵敏度为93.94%(31/33), 特异度为96.97%(32/33).

结论: 基于磁珠分离和MALDI-TOF-MS技术能直接检测出结直肠癌患者血清差异表达蛋白, 建立的诊断模型具有较高的敏感性和特异性, 对提高结直肠癌的诊断具有一定的临床意义.

Keywords: 结直肠癌; 蛋白组学; 纳米磁珠; 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术