Published online 2012-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i19.1763
修回日期: 2012-03-24
接受日期: 2012-04-19
在线出版日期: 2012-07-08
目的: 研究促肾上腺皮质释放因子(CRF)介导肠上皮细胞中Toll样受体4(toll-like receptor 4, TLR4)的表达, 并探讨其可能通过的受体途径.
方法: 常规培养人结肠上皮细胞株HT-29细胞, 将HT-29细胞分为正常对照组(不加刺激剂), 脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激组(LPS 20 μg/L刺激24 h), 促肾上腺皮质释放因子(corticotrophin-releasing factor, CRF)刺激组(CRF 20 μg/L刺激24 h), CRF+LPS刺激组(预先CRF 20 μg/L刺激12 h, 更换细胞液后再与LPS 20 μg/L刺激12 h), CRF+Antalarmin组(CRF与Antalarmin 20 μg/L共刺激24 h), CRF+LPS+Antalarmin组(CRF与Antalarmin 20 μg/L共刺激12 h后再以LPS刺激12 h), CRF+Astressin2B组(CRF与Astressin2B 20 μg/L共刺激24 h), CRF+LPS+Astressin2B组(CRF与Astressin2B 20 μg/L共刺激12 h后再以LPS刺激12 h). 刺激结束后, 收取各组HT-29细胞, RT-PCR法和免疫印迹法检测各组上皮细胞中TLR4 mRNA和蛋白的表达. ELISA法检测各组细胞上清液中IL-8的表达.
结果: CRF可以诱导人结肠上皮细胞株HT-29细胞中TLR4表达导致IL-8分泌增多(P<0.05), CRF1受体拮抗剂不能有效地阻滞CRF对TLR4的诱导(P>0.05, CRF+LPS组 vs CRF组), CRF2受体拮抗剂可阻滞CRF对TLR4的诱导(P<0.05, CRF+LPS组 vs CRF组).
结论: CRF通过CRF2受体通路介导肠上皮细胞中TLR4的表达.