Published online 2012-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v20.i18.1616
修回日期: 2012-04-19
接受日期: 2012-05-20
在线出版日期: 2012-06-28
目的: 探讨Urotensin Ⅱ(UⅡ)在急性肝衰竭(acute liver failure, ALF)小鼠肝组织中的表达及损伤作用.
方法: ♂Balb/c小鼠随机分成4组(每组6只): 正常对照组(A组)、预处理对照组(B组)、模型组(C组)和预处理模型组(D组). 模型动物以脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)/D-半乳糖胺(D-galactosamine, D-GalN)腹腔注射, 预处理动物在造模前30 min, 用UⅡ受体拮抗剂Urantide 0.6 mg/kg尾静脉注射. LPS/D-GalN攻击12 h后, 采集血清和肝组织标本, 并观察24 h小鼠存活情况; 采用Reitman-Frankel法检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate amino-transferase, AST)活性水平; 采用HE染色显微镜观察肝组织损伤程度; RT-PCR法检测UⅡ及其受体UT mRNA的表达; ELISA法检测血清UⅡ多肽分泌水平; 免疫组织化学方法检测肝组织UⅡ多肽及其UT受体蛋白质表达.
结果: C组小鼠死亡率为66.7%, A、B和D组所有动物均存活; LPS/D-GalN攻击引起C和D组小鼠血清ALT和AST水平显著升高(P<0.01), 而D组较C组显著降低(2 271.09 U/L±102.24 U/L vs 1 160.67 U/L±258.32 U/L, 1 569.42 U/L±204.04 U/L vs 1 030.31 U/L±108.09 U/L, P<0.01); C组小鼠肝组织结构破坏明显, 见大片出血性坏死及炎症表现, D组肝组织结构保持完整, 仅有局灶性出血坏死, 炎症明显减轻; C和D组小鼠血清UⅡ多肽水平较A和B组高(P<0.01), 但D组较C组明显降低(3.73 μg/L±0.52 μg/L vs 1.90 μg/L±0.27 μg/L, P<0.01); LPS/D-GalN诱导了C和D组小鼠肝组织UⅡ和UT的mRNA及蛋白质高水平表达, 而D组的表达水平较C组显著降低(P<0.01).
结论: LPS/D-GalN可诱导ALF小鼠肝组织表达和分泌UⅡ, 并促进肝组织UT受体的表达; UⅡ的表达与分泌可能存在正反馈调控机制; UⅡ/UT受体介导了LPS/D-GalN诱导的ALF的发生.