临床研究
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世界华人消化杂志. 2012-05-18; 20(14): 1204-1209
Published online 2012-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v20.i14.1204
肝衰竭患者血浆对HepG2细胞增殖的抑制及表皮生长因子的调控作用
李玮, 林世德, 龙骏
李玮, 林世德, 龙骏, 遵义医学院附属医院感染科 贵州省遵义市 563000
李玮, 硕士研究生, 主要从事重型肝炎肝再生发病机制及其治疗方面的研究.
基金项目: 贵州省重大国际合作基金资助项目, No. 黔科合外字(2007)400121.
作者贡献分布: 此课题由林世德与李玮共同设计; 研究过程由林世德指导, 李玮操作完成, 龙骏提供实验技术支持; 数据分析由李玮完成; 论文写作由林世德指导, 李玮完成.
通讯作者: 林世德, 教授, 563000, 贵州省遵义市大连路149号, 遵义医学院附属医院感染科. linshide6@hotmail.com
电话: 0852-8609183
收稿日期: 2012-02-01
修回日期: 2012-03-15
接受日期: 2012-04-17
在线出版日期: 2012-05-18
Abstract

目的: 探讨IL-17细胞因子在TNBS诱导的炎性肠病动物模型中的表达变化, 明确IL-17和脂多糖(LPS)在诱导HT-29肠上皮细胞IL-8表达中的协同作用及细胞内信号机制探讨肝衰竭患者血浆(liver failure plasma, LFP)抑制HepG2细胞生长、增殖的机制及表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)对其抑制作用的调控作用.

方法: 通过用50%LFP与HepG2细胞共同培养(肝衰竭组), 以相同浓度正常人血浆(正常对照组)作对照. 采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)、Hoechst法分别观察不同时间点细胞增殖率及凋亡率, 并用Western blotting法检测细胞周期蛋白Cyclin D1、细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin-dependent kinase 4, CDK4)表达. 进一步观察不同浓度EGF对LFP培养的HepG2细胞生长及增殖的刺激作用.

结果: 50%LFP对HepG2细胞生长及增殖有明显的抑制作用, 且呈时间依赖性. EGF对正常对照组HepG2细胞的生长及增殖有明显促进作用, 但仅大剂量EGF对肝衰竭组HepG2细胞生长和增殖有一过性刺激作用. 与EGF刺激正常对照组比较, 肝衰竭组各时间点细胞增殖仍受到明显抑制. LFP与HepG2细胞培养后, 细胞凋亡率无明显增加(P>0.05). 随着作用时间的延长, LFP抑制HepG2细胞内Cyclin D1、CDK4的表达.

结论: LFP对HepG2细胞生长及增殖具有较强的抑制作用, 但并不明显诱导其凋亡. 大剂量EGF对LFP培养的HepG2细胞增殖虽有一过性刺激作用, 但并不能逆转其抑制作用. LFP抑制HepG2细胞生长和增殖的机制可能与其抑制细胞内Cyclin D1、CDK4的表达有关.

Keywords: 肝衰竭; 血浆; HepG2细胞株; 生长; 增殖