Published online 2012-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i13.1123
修回日期: 2012-03-13
接受日期: 2012-03-25
在线出版日期: 2012-05-08
目的: 研究nesfatin-1对离体培养的大鼠胃黏膜酸分泌的影响, 探讨nesfatin-1对H+/K+-ATP酶mRNA及蛋白表达的影响.
方法: 酶解法分离大鼠胃黏膜细胞, 细胞免疫荧光检测法鉴定细胞. 用不同浓度的nesfatin-1(10-4-10-1 μmol/L)对胃黏膜细胞进行处理0、1、2、3、4 h, 设立空白对照组, 以14C-氨基比林摄取为酸分泌指标, 检测nesfatin-1对大鼠离体的胃黏膜细胞酸分泌的影响. 用RT-PCR法及Western印迹法检测nesfatin-1对胃黏膜细胞H+/K+-ATP酶alpha(α)亚基和beta(β)亚基mRNA及蛋白表达的影响.
结果: Nesfatin-1在10-1 μmol/L浓度下, 在1、2 h能够抑制离体培养的大鼠胃黏膜细胞的酸分泌. Nesfatin-1(10-1 μmol/L)在1、2、3 h均能够抑制H+/K+-ATP酶α亚基mRNA表达水平; 在1、2 h能够抑制H+/K+-ATP酶β亚基mRNA表达水平, 分别与对照组相比, 差异有统计学意义(均P<0.01). Nesfatin-1(10-4-10-1 μmol/L)作用胃黏膜细胞2 h时, 呈剂量依赖性抑制α亚基和β亚基mRNA表达水平, 分别与对照组相比, 差异有统计学意义(均P<0.01). Nesfatin-1(10-1 μmol/L)在1、2、3 h能够抑制α亚基蛋白表达水平; 在2、3 h能够抑制β亚基蛋白表达水平, 分别与对照组相比, 差异有统计学意义(均P<0.01). Nesfatin-1(10-3-10-1 μmol/L)作用胃黏膜细胞2 h时, 呈剂量依赖性抑制α亚基和β亚基蛋白表达水平, 与对照组相比, 差异有统计学意义(均P<0.01).
结论: Nesfatin-1能抑制离体培养的大鼠胃黏膜细胞的酸分泌, 有可能是通过下调H+/K+-ATP酶α亚基和β亚基的mRNA及蛋白表达的水平影响酸分泌.