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世界华人消化杂志. 2012-05-08; 20(13): 1081-1087
Published online 2012-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i13.1081
Published online 2012-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i13.1081
转染重组质粒pBudCE4.1-CYP 3A4-GST A1的肝细胞系的建立及功能评价
常彬霞, 貌盼勇, 游绍莉, 李保森, 辛绍杰, 中国人民解放军第302医院 北京市 100039
常彬霞, 主治医师, 主要从事病毒性肝炎及非感染性肝病的研究.
基金项目: 中国人民解放军军队临床高新技术重大基金资助项目, No. 2010gxj097.
作者贡献分布: 此课题由辛绍杰、貌盼勇及常彬霞共同设计; 具体实验、统计学分析由常彬霞、游绍莉及李保森完成; 论文撰写由常彬霞完成; 辛绍杰与貌盼勇审校.
通讯作者: 辛绍杰, 教授, 100039, 北京市, 中国人民解放军第302医院. xsj302@263.net
电话: 010-66933129-6024
收稿日期: 2012-01-29
修回日期: 2012-03-05
接受日期: 2012-03-25
在线出版日期: 2012-05-08
修回日期: 2012-03-05
接受日期: 2012-03-25
在线出版日期: 2012-05-08
Abstract
目的: 获得一株适合用于生物人工肝支持系统的细胞材料.
方法: 用已构建好的重组质粒pBudCE4.1-CYP 3A4-GST A1转染肝脏肿瘤细胞系C3A, 用Zeocin筛选, 所得细胞系命名为C3A-未优势化; 通过qRT-PCR方法检测目的基因表达情况; 对转染重组质粒的肝脏肿瘤细胞系C3A的合成、代谢、解毒等功能及性状进行综合评价.
结果: 成功构建了转染重组质粒pBudCE4.1-CYP 3A4-GST A1的细胞系; 构建好的C3A-未优势化细胞系通过qRT-PCR方法检测其目的基因CYP 3A4和GST A1的表达量较正常C3A细胞系高; 通过色谱法证明CYP 3A4活性较正常C3A细胞系高; 用免疫组织化学实验证实目的基因GST A1的表达较正常C3A细胞系多; 另外, 对利多卡因的代谢能力亦高于正常C3A细胞.
结论: 构建的C3A-未优势化细胞系功能有所改善, 有望成为生物人工肝系统的细胞材料.
Keywords: 细胞色素P450 3A4; 谷胱甘肽硫转移酶A1; 药物代谢; 生物人工肝支持系统