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高糖对大鼠结肠平滑肌细胞表达内源性胰岛素样生长因子1的影响
徐新寓, 王云, 杨微微, 林琳, 南京医科大学第一附属医院消化科 江苏省南京市 210029
徐新寓, 在读硕士, 主要从事胃肠动力性疾病方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30971354; 江苏省国际科技合作计划基金资助项目, No. BZ2011044; 江苏省研究生教育创新工程基金资助项目, No. CXZZ11_0704.
作者贡献分布: 该课题由王云、徐新寓及林琳共同设计; 研究过程由徐新寓、王云及杨微微操作完成; 研究所用试剂及分析工具由王云与徐新寓提供; 数据分析由徐新寓完成; 论文撰写由徐新寓完成; 林琳与王云协助课题设计并修改论文.
通讯作者: 林琳, 教授, 210029, 江苏省南京市广州路300号, 南京医科大学第一附属医院消化科. lin9100@yahoo.com.cn
电话: 025-68136920
收稿日期: 2011-12-20
修回日期: 2012-02-20
接受日期: 2012-03-20
在线出版日期: 2012-04-28
修回日期: 2012-02-20
接受日期: 2012-03-20
在线出版日期: 2012-04-28
Abstract
目的: 探讨高糖对大鼠结肠平滑肌细胞(SMCs)表达内源性胰岛素样生长因子1(IGF-1)的影响.
方法: 酶解法分离培养SD大鼠结肠SMCs, α-actin免疫荧光鉴定, 然后将大鼠结肠SMCs随机给予葡萄糖不同浓度(5.5 mmol/L和25 mmol/L)组及甘露醇对照组(5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)刺激, CCK8实验检测SMCs增殖情况; 流式细胞术检测SMCs细胞周期; ELISA检测培养液上清中IGF-1的含量; Western blot、Real-time PCR法检测SMCs合成内源性IGF-1的表达变化.
结果: 高糖(25 mmol/L)抑制大鼠结肠SMCs的增殖, 在24 h与正常糖浓度间差异最大(0.494±0.003 vs 0.597±0.044, P<0.05); 高糖使约90%的结肠SMCs停滞在G1期(90.850%±0.706% vs 55.202%±3.807%, P<0.05), 进入S期的SMCs明显减少(3.622%±0.156% vs 30.780%±3.808%, P<0.05); 高糖环境中, 结肠SMCs合成分泌的IGF-1减少(208.000 ng/L±31.443 ng/L vs 265.750 ng/L±26.538 ng/L, P<0.05), SMCs表达内源性的IGF-1 mRNA和蛋白也均减少(2.037±0.196 vs 2.257±0.273; 0.247±0.045 vs 0.906±0.103, P<0.05).
结论: 高糖抑制大鼠结肠SMCs增殖, 使SMCs内源性IGF-1表达减少.
Keywords: 高糖; 结肠平滑肌细胞; 细胞周期; 胰岛素样生长因子1