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IL-17在炎性肠病中的表达及其与LPS协同诱导肠上皮细胞表达IL-8的作用机制
林艳华, 周平, 夏廷毅, 中国人民解放军空军总医院肿瘤放疗科 北京市 100142
马培娥, 济南市第五人民医院 山东省济南市 250022
林艳华, 郭小芹, 沈倍奋, 黎燕, 韩根成, 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室 北京市 100850
林艳华, 在读硕士, 主要从事自身免疫性炎性肠病免疫学机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81072475; 国家973重点研究计划基金资助项目, No. 2007CB512406.
作者贡献分布: 此课题由周平与韩根成设计; 研究过程由林艳华与郭小芹操作完成; 研究所用试剂及分析工具由韩根成、沈倍奋、黎燕、夏廷毅及马培娥提供; 数据分析由林艳华完成; 本论文写作由林艳华完成.
通讯作者: 周平, 副主任医师, 100142, 北京市, 中国人民解放军空军总医院肿瘤放疗科. zhouping4946@yahoo.com.cn
收稿日期: 2011-12-23
修回日期: 2012-03-15
接受日期: 2012-03-25
在线出版日期: 2012-04-28
修回日期: 2012-03-15
接受日期: 2012-03-25
在线出版日期: 2012-04-28
Abstract
目的: 探讨IL-17细胞因子在TNBS诱导的炎性肠病动物模型中的表达变化, 明确IL-17和脂多糖(LPS)在诱导HT-29肠上皮细胞IL-8表达中的协同作用及细胞内信号机制.
方法: 探讨IL-17及其受体在TNBS炎性肠病模型中的表达变化, 利用细胞培养、FASC、Real-time PCR、酶联免疫吸附(ELISA)、Western blot等技术, 观察IL-17及不同剂量LPS干预人肠上皮细胞(HT-29细胞)后细胞因子IL-8在蛋白水平的表达, 以及IL-17受体(IL-17Ra)在mRNA水平的表达变化及引起上述效应的细胞内信号传导机制.
结果: TNBS诱导的炎性肠病动物模型中IL-17以及IL-17Ra显著升高(P<0.03); 炎症介质IL-17能与一定浓度范围内的LPS协同促进IL-8的表达(2187.61±132.42 vs 2634.27±134.63, P = 0.01), 增强NF-κB信号通路的活化, 促进炎症反应. 但随着LPS剂量升高, LPS本身诱导IL-8表达的活性降低, 且与IL-17的协同作用消失(1841.43±50.38 vs 1685.67±71.47, P = 0.03).
结论: IL-17与低浓度的LPS可协同促进HT-29细胞炎症介质的表达, 但与高浓度LPS联合时, 两者无协同效应.
Keywords: 白介素-17; 炎症性肠病; 脂多糖; 白介素-8; HT-29细胞