基础研究
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世界华人消化杂志. 2012-04-18; 20(11): 923-929
Published online 2012-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v20.i11.923
低表达Smad4对肝癌细胞SMMC-7721上皮间质转化的影响
薛慧婷, 王宏刚, 黄晓丹, 沈鹏, 季国忠
薛慧婷, 王宏刚, 黄晓丹, 沈鹏, 季国忠, 南京医科大学第二附属医院消化医学中心 南京医科大学消化内镜研究所 江苏省南京市 210011
薛慧婷, 硕士, 主要从事肝癌发病机制的研究.
基金项目: 江苏省卫生厅科技基金资助项目, No. H201009; 南京医科大学科技发展基金资助项目, No. 2010NJMUZ54; 江苏省六大人才高峰基金资助项目, No. 2009041; 南京市科技发展基金资助项目, No. 201104029.
作者贡献分布: 此课题由薛慧婷、王宏刚、黄晓丹及季国忠设计; 实验操作由薛慧婷、王宏刚及沈鹏完成; 数据分析由薛慧婷完成; 论文写作由薛慧婷与黄晓丹完成.
通讯作者: 季国忠, 教授, 210011, 江苏省南京市下关区姜家园121号, 南京医科大学第二附属医院消化医学中心, 南京医科大学消化内镜研究所. jgzzl@163.com
电话: 025-58509996
收稿日期: 2012-01-15
修回日期: 2012-02-15
接受日期: 2012-03-06
在线出版日期: 2012-04-18
Abstract

目的: 探讨低表达Smad4调控上皮间质转化影响肝癌细胞(hepatocellular carcinoma cells, HCC)侵袭转移的相关机制.

方法: 采用Western blot法观察低表达Smad4对β-catenin和Vimentin总蛋白表达水平的影响; 逆转录PCR法测定低表达Smad4后, β-catenin和Vimentin mRNA表达的变化; 细胞免疫荧光法检测Smad4、β-catenin和Vimentin在肝癌细胞SMMC-7721及其转染组中的定位及荧光表达强度.

结果: 低表达Smad4后, 相较于CON组和RNAi-NC组, 在转染组RNAi-Smad4-2和RNAi-Smad4-12细胞中, β-catenin mRNA和相应总蛋白的表达水平明显增加(P<0.05), 并促使其发生了核转位的改变; 另一方面, 在RNAi-Smad4-2和RNAi-Smad4-12两转染组细胞中, Vimentin的蛋白表达水平和相应胞浆荧光的表达强度比对照组明显下调(P<0.05), 相应mRNA的表达水平在肝癌SMMC-7721细胞及其转染组无显著差异.

结论: 低表达Smad4可调控上皮间质转化相关标志物β-catenin和Vimentin的表达, 发挥抑制肝癌SMMC-7721细胞上皮间质转化的作用.

Keywords: Smad4; 肝癌细胞; 上皮向间质转化; β-catenin; Vimentin