基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-03-28; 19(9): 892-898
Published online 2011-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v19.i9.892
JNK信号通路介导MDR1/P-gp调控人结肠癌多药耐药
隋华, 周利红, 殷佩浩, 王炎, 范忠泽, 周树峰, 李琦
隋华, 周利红, 殷佩浩, 王炎, 范忠泽, 李琦, 上海中医药大学附属普陀医院 上海中医药大学中西医结合肿瘤介入研究所 上海市 200062
周树峰, 南佛罗里达大学药学院 美国佛罗里达州坦帕市 33612
隋华, 住院医师, 主要从事消化系肿瘤防治方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 308734; 上海市科委基金资助项目, No. 10ZR1427400; No. 10140902600; 上海市教委科研创新基金资助项目, No. 09YZ132; 上海市重点学科基金资助项目, No. S30302.
作者贡献分布: 此课题由隋华、范忠泽及李琦共同设计; 研究过程由周利红与殷佩浩操作完成; 数据分析和本论文写作由隋华与王炎完成; 周树峰与李琦审定.
通讯作者: 李琦, 副教授, 硕士生导师, 200062, 上海市兰溪路164号, 上海中医药大学附属普陀医院, 上海中医药大学中西医结合肿瘤介入研究所. lzwf@hotmail.com
收稿日期: 2011-01-14
修回日期: 2011-01-30
接受日期: 2011-02-15
在线出版日期: 2011-03-28
Abstract

目的: 探讨在人结肠癌多药耐药细胞株HCT8/V中JNK信号传导通路与多药耐药1(MDR1)基因表达的关系.

方法: MTT法检测人结肠癌多药耐药细胞株HCT8/V及其敏感株HCT8细胞对多种抗肿瘤药物的敏感性; 抑制JNK信号通路的激活后, 采用双荧光素酶活性报告基因检测MDR1启动子转录活性的表达; 实时荧光定量PCR检测MDR1 mRNA的表达; Western blot分析对P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.

结果: HCT8/V细胞对长春新碱(VCR)的耐药倍数为10.49倍. 加入JNK特异性抑制剂sp600125(20 μmol/L)抑制后, HCT8/V细胞对VCR的半数抑制浓度(IC50)由191.08 mg/L±18.18 mg/L降低到50.34 mg/L±15.71 mg/L, 逆转指数为3.80(P<0.01). HCT8/V细胞加入JNK抑制剂后, MDR1启动子活性从0.03647±0.00191降低到0.01362±0.00196, 下降了2.52倍(P<0.01). 实时荧光定量PCR、Western blot检测结果提示, 抑制JNK通路的激活后, HCT8/V细胞的MDR1 mRNA从0.34275±0.0339下降到0.13625±0.0196(P<0.01), P-gp表达从0.88132±0.1026下降到0.56174±0.1014(P<0.01).

结论: JNK信号通路通过介导MDR1/P-gp调控人肠癌多要耐药, 抑制JNK信号通路可降低MDR1/P-gp的水平, 逆转人结肠癌HCT8/V细胞的多药耐药性.

Keywords: 结肠癌; 多药耐药1; P-糖蛋白; c-Jun氨基末端激酶; 信号转导通路