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ERK1/2 siRNA干扰质粒对IGF-1诱导结肠平滑肌细胞产生干细胞因子的影响
袁玉丰, 余盈娟, 林琳, 南京医科大学第一附属医院消化科 江苏省南京市 210029
袁玉丰, 在读硕士, 主要从事胃肠动力性疾病方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30971354;江苏省自然科学基金资助项目, No. BK2008466.
作者贡献分布: 该课题由袁玉丰与林琳共同设计; 研究过程由袁玉丰操作完成; 研究所用试剂及分析工具由袁玉丰提供; 数据分析由袁玉丰与余盈娟完成; 论文撰写由袁玉丰完成; 林琳协助课题设计并修改论文.
通讯作者: 林琳, 教授, 210029, 江苏省南京市广州路300号, 南京医科大学第一附属医院消化科. lin9100@yahoo.com.cn
收稿日期: 2010-11-24
修回日期: 2011-01-04
接受日期: 2011-01-11
在线出版日期: 2011-02-28
修回日期: 2011-01-04
接受日期: 2011-01-11
在线出版日期: 2011-02-28
Abstract
目的: 探讨IGF-1诱导的大鼠结肠平滑肌细胞(SMC)产生干细胞因子(SCF)的信号途径.
方法: 以不同时间(0, 5, 15, 30, 45, 60 min)、不同浓度(0, 50, 100, 150 μg/L)的IGF-1诱导结肠SMC; 以ERK1/2 siRNA干扰质粒转染大鼠结肠SMC, RT-PCR及Western blot检测IGF-1诱导下结肠SMC产生ERK1/2及SCF的变化.
结果: 在15 min时IGF-1诱导结肠SMC表达磷酸化ERK1/2最强(0.417±0.036 vs 0.101±0.015, P<0.05). 在100 μg/L作用15 min时磷酸化ERK1/2和SCF表达最强(0.790±0.051 vs 0.336±0.013; 0.765±0.061 vs 0.289±0.021, 均P<0.05). 在IGF-1诱导下, 转染入ERK1/2 siRNA的结肠SMC产生的p-ERK1/2、t-ERK1/2及SCF较对照组明显降低(0.284±0.021 vs 0.732±0.005; 0.256±0.015 vs 0.712±0.023; 0.219±0.020 vs 0.673±0.013; 0.621±0.027 vs 1.725±0.012; 0.821±0.019 vs 1.751±0.043; 0.275±0.061 vs 0.531±0.047; 均P<0.05).
结论: IGF-1可以使结肠SMC表达磷酸化ERK1/2和SCF增加. ERK1/2 siRNA可使ERK1/2和结肠SMC产生的SCF明显降低, 从而证实IGF-1促进大鼠结肠SMC产生SCF是通过ERKMAPK通路.
Keywords: ERK1/2; 转染; 胰岛素样生长因子1; 结肠平滑肌细胞; 干细胞因子