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世界华人消化杂志. 2011-12-18; 19(35): 3568-3573
Published online 2011-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i35.3568
Published online 2011-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i35.3568
胃癌多药耐药蛋白的相互作用蛋白鉴定及分子机制
伍小平, 唐英姿, 伍尤华, 南华大学附属第一医院肿瘤内科 湖南省衡阳市 421001
黄卫国, 南华大学肿瘤研究所 湖南省衡阳市 421001
伍小平, 硕士, 主要从事肿瘤化疗及其耐药机制.
基金项目: 湖南省卫生厅科研基金资助项目, No. B2009052.
作者贡献分布: 伍小平与黄卫国对此文所作贡献均等; 此课题由伍小平与黄卫国设计; 研究过程由伍小平、黄卫国、唐英姿及伍尤华操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由伍小平提供; 数据分析由黄卫国完成; 本论文写作由伍小平、黄卫国、唐英姿及伍尤华完成.
通讯作者: 伍小平, 副教授, 副主任医师, 421001, 湖南省衡阳市, 湖南省南华大学附一医院肿瘤内科. wxp19730806@sina.com
电话: 0734-8279059
收稿日期: 2011-10-05
修回日期: 2011-11-20
接受日期: 2011-12-07
在线出版日期: 2011-12-18
修回日期: 2011-11-20
接受日期: 2011-12-07
在线出版日期: 2011-12-18
Abstract
目的: 研究多药耐药蛋白(multidrug resistance protein, MRP)的相互作用蛋白及其对肿瘤耐药性的影响.
方法: 采用免疫沉淀结合质谱方法分离鉴定MRP的相互作用蛋白, 并对其中的耐药相关蛋白之一Annexin A5进行功能研究, Western blot及siRNA干扰技术分析MRP、Annexin A5蛋白表达的变化、相关性及胃癌SGC-7901细胞的耐药性变化.
结果: 经免疫沉淀结合质谱方法分离鉴定发现了14个MRP的相互作用蛋白, 其中Annexin A5为其中得分最高的蛋白; Western blot检测显示耐药细胞株SGC-7901/DDP中MRP、Annexin A5蛋白表达均高于SGC-7901和siRNA-SGC-7901/DDP, siRNA干扰Annexin A5表达后, siRNA-SGC-7901/DDP中MRP蛋白表达下调, MRP、Annexin A5蛋白在SGC-7901和siRNA-SGC-7901/DDP之间表达无明显差异; MTT法结果显示经siRNA干扰SGC-7901/DDP后, 顺铂、5-Fu和紫杉醇作用后的IC50值明显减少, 对其的敏感性分别增加了36倍、17倍和4倍.
结论: Annexin A5表达与胃癌细胞耐药有关, 是MRP的相互作用蛋白之一.
Keywords: 多药耐药蛋白; 多药耐药性; 膜联蛋白A5; 胃癌