基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-12-18; 19(35): 3562-3567
Published online 2011-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i35.3562
5-Aza-dC及TSA对人胃癌细胞株SGC-7901 Runx3基因甲基化及表达水平的影响
方中良, 沈干, 胡世莲, 孙玉蓓, 徐维平, 黄大兵, 姜晓东, 王海, 黄毕林
方中良, 沈干, 胡世莲, 王海, 黄毕林, 安徽医科大学附属安徽省立医院老年医学科 安徽省合肥市 230001
孙玉蓓, 黄大兵, 姜晓东, 安徽医科大学附属安徽省立医院肿瘤科 安徽省合肥市 230001
徐维平, 安徽省循证医学中心 安徽省合肥市 230001
方中良, 在读硕士, 主要从事老年肿瘤疾病相关研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81071808;安徽省卫生厅基金资助项目, No. 09A083.
作者贡献分布: 此课题由沈干与胡世莲设计; 研究过程由方中良、孙玉蓓、徐维平、黄大兵、姜晓东、王海及黄毕林操作完成; 研究所用试剂及分析工具由胡世莲提供; 数据分析由方中良完成; 本论文写作由方中良与沈干完成.
通讯作者: 沈干, 教授, 230001, 安徽省合肥市庐江路17号, 安徽医科大学附属安徽省立医院老年医学科. shenganbjw@126.com
电话: 0551-2283589
收稿日期: 2011-09-23
修回日期: 2011-10-28
接受日期: 2011-11-04
在线出版日期: 2011-12-18
Abstract

目的: 探讨5-Aza-dC及TSA对人胃癌细胞系SGC-7901中抑癌基因Runx3启动子区甲基化、mRNA及蛋白表达水平的影响.

方法: 单独或联合应用5-Aza-dC及TSA处理体外培养的SGC-7901细胞, 提取各组细胞的DNA、RNA及蛋白质, 应用甲基化特异性定量PCR法(QMSP)检测Runx3基因启动子区甲基化状态, 逆转录PCR法(RT-PCR)检测Runx3 mRNA的表达, 免疫印迹法(Western blotting)法检测Runx3蛋白表达水平.

结果: 5-Aza-dC和TSA均能降低Runx3基因启动子区的甲基化水平(5-Aza-dC组及TSA组分别为对照组的0.70倍、0.63倍), 提高mRNA表达水平(0.29±0.01、0.28±0.03 vs 0.14±0.03, P<0.05)及蛋白表达水平(0.35±0.02、0.37±0.02 vs 0.09±0.01, P<0.05); 与单独使用5-Aza-dC和TSA相比, 两药联合组Runx3基因启动子区甲基化水平(对照组的0.37倍)及mRNA表达水平(0.45±0.02)和蛋白表达水平(0.50±0.01)均较单药组效果更明显(P<0.05).

结论: 5-Aza-dC和TSA均能逆转胃癌细胞SGC-7901 Runx3基因的甲基化水平, 恢复其mRNA和蛋白表达, 且具有协同作用, 为5-Aza-dC和TSA应用于胃癌的临床治疗提供了试验依据.

Keywords: 胃癌; 甲基化; 5-氮杂-2'-脱氧胞苷; 曲古抑菌素A; Runx3