基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-10-28; 19(30): 3117-3121
Published online 2011-10-28. doi: 10.11569/wcjd.v19.i30.3117
一种用于HCV核心蛋白体外表达研究的CHO细胞模型的建立
薛宏丽, 冯国和
薛宏丽, 冯国和, 中国医科大学附属盛京医院感染科 辽宁省沈阳市 110004
薛宏丽, 辽宁省人民医院感染科 辽宁省沈阳市 110016
薛宏丽, 硕士, 主要研究方向为传染病.
作者贡献分布: 此课题研究过程与实验操作由薛宏丽完成; 冯国和负责设计与论文修改.
通讯作者: 冯国和, 教授, 110004, 辽宁省沈阳市三好街36号, 中国医科大学附属盛京医院感染科. fenggh@sj-hospital.org
电话: 024-96615-62101
收稿日期: 2011-09-01
修回日期: 2011-10-15
接受日期: 2011-10-21
在线出版日期: 2011-10-28
Abstract

目的: 建立丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)核心(core, C)蛋白体外表达的非肝细胞模型.

方法: 核酸酶切法鉴定含有HCV1b基因型C蛋白编码基因的重组质粒pCMH6K的稳定性, 将pCMH6K瞬时及稳定转染于中华仓鼠卵巢(China hamster ovary, CHO)细胞并连续传代110 d, 免疫荧光法检测转染细胞内HCV C蛋白分布特征, RT-PCR法检测转染细胞内HCV C mRNA.

结果: pCMH6K含有与HCV1b基因型C蛋白编码基因(573 bp)相一致的特异性片段; 在pCMH6K瞬时以及稳定转染的CHO细胞内可见HCV C蛋白主要分布在胞质, 少部分在胞膜; 在不同时期稳定转染CHO细胞中均可见到与HCV C mRNA相一致的基因特异性片段(267 bp).

结论: 成功建立了能够持续表达HCV C蛋白的CHO细胞株.

Keywords: 丙型肝炎病毒; 核心蛋白; 中华仓鼠卵巢细胞; 细胞传代