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Wnt信号通路在HepG2细胞株及其克隆形成细胞中表达的异质性
王宝松, 魏德全, 于树娜, 姜栋栋, 赵金岭, 史才兴, 蒋吉英, 潍坊医学院解剖学教研室 山东省潍坊市 261053
基金项目: 山东省"泰山学者"建设工程专项基金资助项目; 山东省科技攻关计划项目基金资助项目, No. 2006GG3202016.
作者贡献分布: 王宝松与蒋吉英对此文贡献均等; 此课题由王宝松、蒋吉英、魏德全及于树娜设计; 研究过程由王宝松、魏德全、姜栋栋、赵金岭及史才兴操作完成; 研究所用试剂由王宝松与蒋吉英提供; 数据分析由王宝松、蒋吉英及魏德全完成; 本论文写作由王宝松、蒋吉英及于树娜完成.
通讯作者: 蒋吉英, 教授, 261053, 山东省潍坊市, 潍坊医学院解剖学教研室. jiangjiying2002@163.com
电话: 0536-8462049
收稿日期: 2010-09-16
修回日期: 2010-10-27
接受日期: 2010-11-02
在线出版日期: 2011-01-28
修回日期: 2010-10-27
接受日期: 2010-11-02
在线出版日期: 2011-01-28
Abstract
目的: 研究Wnt信号传导通路的关键因子β-catenin和COX-2在肝癌细胞株HepG2及其克隆形成细胞中的表达, 探讨Wnt信号传导通路在不同增殖能力细胞中表达的异质性.
方法: 以HepG2细胞为研究对象, 采用软琼脂克隆形成实验筛选克隆形成细胞, 应用RT-PCR、免疫化学和Western blot等技术, 检测Wnt信号传导通路的关键因子β-catenin和COX-2在肝癌细胞株HepG2及其克隆形成细胞中的表达.
结果: β-catenin mRNA和蛋白质在克隆形成细胞中的表达水平高于HepG2细胞(0.905 vs 0.549; 1.021 vs 0.700; 均P<0.05). β-catenin的阳性信号在HepG2细胞中主要分布于细胞质, 克隆形成细胞中主要分布于细胞核. COX-2 mRNA和蛋白质在HepG2细胞中的表达高于克隆形成细胞(0.857 vs 0.527; 0.731 vs 0.434; 均P<0.05). 大多数HepG2细胞中表达COX-2蛋白, 阳性反应沉淀物主要位于细胞质, 少数克隆形成细胞中有COX-2蛋白弱表达.
结论: Wnt信号传导途径的关键因子β-catenin和COX-2与肝癌分化程度相关. β-catenin和COX-2等Wnt信号传导通路的关键因子在肝癌细胞HepG2及其克隆形成细胞的分布模式支持克隆形成细胞具有肝癌干细胞的特征.
Keywords: Wnt; β-catenin; COX-2; 软琼脂克隆; 肝癌; HepG2