Copyright
©The Author(s) 2011. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
WWOX基因转染对胆管癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响
朱凯, 黄强, 邵峰, 安徽医科大学附属省立医院普外科 安徽省合肥市 230001
任维华, 安徽医科大学附属省立医院肝胆实验室 安徽省合肥市 230001
朱凯, 住院医师, 主要从事胆道肿瘤的基础性研究和胆胰微创外科临床研究.
作者贡献分布: 朱凯与黄强对本文贡献均等; 课题由朱凯与黄强共同设计; 实验过程及数据分析由朱凯完成; 邵峰与任维华参与论文资料的查询、整理; 本论文写作由朱凯与黄强完成.
通讯作者: 黄强, 教授, 主任医师, 230001, 安徽省合肥市, 安徽医科大学附属省立医院普外科. zk231500@163.com
收稿日期: 2010-11-03
修回日期: 2010-12-07
接受日期: 2010-12-15
在线出版日期: 2011-01-28
修回日期: 2010-12-07
接受日期: 2010-12-15
在线出版日期: 2011-01-28
Abstract
目的: 探讨WWOX基因转染胆管癌细胞株QBC939后对其增殖、凋亡与侵袭性的影响.
方法: 用脂质体转染法将WWOX重组真核表达质粒转染QBC939细胞, 建立稳定表达WWOX基因的细胞株. 将其分为以下3组: QBC939组, QBC939/con组和QBC939/WWOX组. 荧光定量RT-PCR和Western blot法检测各组WWOX mRNA和蛋白水平的表达; MTT实验检测转染前后各组细胞增殖活性的变化; FCM法检测各组细胞的凋亡; Transwell小室侵袭实验检测各组肿瘤细胞侵袭力的变化.
结果: 建立了稳定表达WWOX基因的QBC939/WWOX细胞株, WWOX mRNA和蛋白的表达增加[3.71(3.64-3.78) vs 1.00(0.98-1.02), 1.07(1.02-1.13); 0.86±0.03 vs 0.25±0.01, 0.27±0.02, 均P<0.05], 转染后的QBC939细胞MTT吸光度明显下降(0.63±0.04 vs 0.90±0.05, 0.87±0.04, 均P<0.01), FCM显示QBC939/WWOX组的细胞凋亡率明显增高(21.4%±2.35% vs 1.24%±0.35%, 1.73%±0.48%, 均P<0.01), 侵袭实验显示转移至下室滤膜的细胞数明显减少(70.00±4.58 vs 102.33±8.33, 107.00±9.00, 均P<0.01).
结论: WWOX基因能抑制胆管癌细胞株QBC939的增殖, 加速肿瘤细胞凋亡并降低其侵袭力, 可能作为胆管癌基因治疗的一个新靶点.
Keywords: 胆管癌; 基因表达; 转染; 增殖; 凋亡; 侵袭; 含有WW结构域的氧化还原酶基因