修回日期: 2010-12-01
接受日期: 2010-12-07
在线出版日期: 2011-01-28
目的: 探讨SUMO-1、MDM2和P53对化疗药5-Fu诱导的HepG2细胞凋亡的影响.
方法: 5-Fu诱导HepG2细胞产生凋亡, 以质粒pCMV-HDM1B(pMDM2)和pcDNA3-His6-SUMO-1(pSUMO-1)转染细胞, 应用Western blot检测经药物诱导及转染前后细胞中内源性P53蛋白的表达强度, 流式细胞仪检测细胞凋亡比例变化.
结果: HepG2细胞内源性P53蛋白表达强度与空白对照组相比明显增高, 于1×10-3 mol/L浓度处最强(90.15%±4.22% vs 11.27%±1.18%, P<0.05). 随5-Fu浓度的增加, HepG2细胞凋亡率逐渐升高, 于1×10-2 mol/L浓度处凋亡率最高(33.61%±3.15% vs 3.22%±0.60%, P<0.05). 转染pMDM2的细胞具有明显的抗凋亡特性, 与同浓度未转染细胞相比, P53蛋白表达强度和细胞凋亡率均明显下降(51.80%±0.78% vs 90.15%±4.22%; 20.45%±2.23% vs 33.61%±3.15%, 均P<0.05). 共转染pSUMO-1的细胞其浓度-蛋白表达强度-凋亡率曲线又接近未转染细胞, 与单纯转染pMDM2细胞相比, P53蛋白表达强度和细胞凋亡率显著上升, 差异有统计学意义(78.85%±2.43% vs 51.80%±0.78%, 29.83%±0.53% vs 20.45%±2.23%, 均P<0.05). 只转染pSUMO-1细胞的P53蛋白表达和凋亡率与未转染细胞相似, 两者间差异无统计学意义.
结论: SUMO-1通过抑制MDM2对P53在胞质的降解及增强P53在细胞核内的表达, 可促进化疗药物诱导的细胞凋亡, 提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性, 在药物诱导的细胞凋亡中具有显著协同效应.