Published online 2011-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i22.2358
修回日期: 2011-08-04
接受日期: 2011-08-06
在线出版日期: 2011-08-08
目的: 研究siRNA抑制NF-κB p65后Bcl-2在肝癌细胞中的变化及对肝癌细胞凋亡的影响.
方法: 选择肝癌细胞HepG2、SMMC7721和人胚胎肝细胞LO2细胞株, 应用Western blot法分别检测NF-κB p65、Bcl-2在不同细胞中的表达; 应用siRNA方法抑制NF-κB p65在肝癌细胞中的表达, 观察NF-κB p65、Bcl-2在肝癌细胞中的变化及应用流式细胞仪观察肝癌细胞的凋亡情况.
结果: Western blot法检测显示NF-κB p65、Bcl-2在肝癌细胞HepG2、SMMC7721中的表达明显高于人胚胎肝细胞LO2(2.14±0.19, 2.09±0.27 vs 0.54±0.11; 1.42±0.15, 1.47±0.14 vs 0.60±0.08, 均P<0.05), 而NF-κB p65、Bcl-2在肝癌细胞HepG2、SMMC7721中的表达差异无统计学意义; 应用siRNA抑制NF-κB p65的表达后, 应用Western blot法检测显示NF-κB p65在肝癌细胞HepG2、SMMC7721中的表达较未转染组明显下降(2.08±0.19 vs 0.99±0.12; 2.03±0.17 vs 0.94±0.14, 均P<0.05), 说明转染成功. 随后应用Western blot法检测显示Bcl-2在肝癌细胞HepG2、SMMC7721中的表达较未转染组明显下降(1.37±0.05 vs 0.72±0.02; 1.44±0.03 vs 0.69±0.03, 均P<0.05), 且肝癌细胞凋亡较未转染组明显增加(5.12%±0.61% vs 37.87%±4.10%; 5.80%±0.71% vs 40.19%±3.78%, 均P<0.05).
结论: siRNA可以成功抑制NF-κB p65在肝癌细胞中的活性, 进一步证实NF-κB p65对Bcl-2具有调控作用, 他们共同参与了肝癌的发生发展过程.