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世界华人消化杂志. 2011-07-18; 19(20): 2116-2122
Published online 2011-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i20.2116
Published online 2011-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i20.2116
DKK1在食管癌组织中的表达及其生物学功能
李书军, 和宇峥, 吕宝雷, 李永军, 张合林, 河北医科大学第二医院胸外科 河北省石家庄市 050051
牛秀兰, 河北省涉县中医院肿瘤科 河北省邯郸市 056400
崔爱荣, 河北医科大学第二医院病理科 河北省石家庄市 050051
李书军, 副教授, 主要从事肺癌、食管癌的临床和基础研究.
作者贡献分布: 此课题由李书军、和宇峥及张合林设计并撰写论文; 研究过程中由吕宝雷、牛秀兰及李永军操作完成, 并进行了数据的分析、处理; 课题中的免疫组织化学和免疫荧光由崔爱荣完成.
通讯作者: 张合林, 教授, 医学博士, 050051, 河北省石家庄市, 河北医科大学第二医院胸外科. thoracic20081069@126.com
电话: 0311-66002333
收稿日期: 2011-03-06
修回日期: 2011-05-26
接受日期: 2011-06-08
在线出版日期: 2011-07-18
修回日期: 2011-05-26
接受日期: 2011-06-08
在线出版日期: 2011-07-18
Abstract
目的: 探讨Dikkopf-1(DKK1)对食管癌细胞周期、侵袭能力的影响.
方法: 采用免疫组织化学的方法检测DKK1在食管癌组织中的表达, 并通过免疫荧光对DKK1在细胞中的分布进行定位分析; 应用Western blot检测食管癌组织及其配对的正常食管组织和4株食管癌细胞系中DKK1蛋白表达水平. 通过构建过表达DKK1的真核表达载体, 将其转染到食管癌EC9706细胞中, 观察细胞周期和侵袭能力的改变.
结果: 免疫组织化学检测食管癌组织中DKK1阳性表达率为83.34%, 免疫荧光结果显示DKK1主要呈细颗粒状散在分布于细胞质中. Western blot检测表明DKK1在食管癌组织中的表达明显高于配对的正常食管组织; 在4株食管癌细胞系中均有不同程度的表达. 在食管癌细胞系EC9706中过表达DKK1, S期细胞所占比例明显升高(57.25% vs 45.87%, P<0.05), 在Boyden小室中穿透基底膜的细胞数目也明显增加(252±6.71 vs 99.18±3.02; 252±6.71 vs 112.33±3.21, 均P<0.01).
结论: DKK1在食管癌组织中呈高表达, 并且在4个食管癌细胞系中均有表达, 在EC9706细胞中过表达DKK1后能够促进细胞由G0/G1期向S期转变, 同时能够增加细胞的侵袭能力.
Keywords: 食管癌; Dikkopf-1; 真核表达载体; 侵袭