基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-07-18; 19(20): 2097-2103
Published online 2011-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i20.2097
ERK1/2信号通路阻断剂PD98059对胃癌细胞MGC-803中RECK、MMP-9基因表达的影响
黄靓, 李国庆, 毛振江, 钟鹰, 殷清华
黄靓, 李国庆, 毛振江, 南华大学附属第二医院消化内科 湖南省衡阳市 421001
钟鹰, 南华大学附属湘潭医院 湖南省湘潭市 411100
殷清华, 南华大学附属第一医院 湖南省衡阳市 421001
黄靓, 硕士, 主要从事消化系统疾病的研究.
作者贡献分布: 黄靓与李国庆对此文所作贡献均等; 此课题由黄靓设计; 李国庆教授指导; 研究过程由黄靓、毛振江及钟鹰操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由黄靓提供; 数据分析由黄靓与殷清华完成; 本论文写作由黄靓完成; 李国庆教授指导.
通讯作者: 李国庆, 教授, 主任医师, 421001, 湖南省衡阳市, 南华大学附属第二医院消化内科. ligq1970@yahoo.com.cn
电话: 0734-8288962
收稿日期: 2011-05-07
修回日期: 2011-06-23
接受日期: 2011-06-28
在线出版日期: 2011-07-18
Abstract

目的: 探讨ERK1/2信号通路在RECK基因抑制侵袭转移中的作用.

方法: 体外培养人胃癌MGC-803细胞, 采用MTT法观察胃癌细胞MGC-803增殖情况, Western blot检测P-ERK的蛋白表达, RT-PCR法和Western blot法检测RECK和基质金属蛋白酶9(MMP-9) mRNA和蛋白表达.

结果: MTT法显示PD98059在一定范围内能够明显抑制胃癌MGC803细胞增殖, 其作用具有时间依赖性及浓度依赖性, PD98059的有效浓度为25 μmol/L, 在此浓度下有效时间为24 h; Western blot法检测结果显示PD98059能够抑制ERK1/2的磷酸化, 即下调P-ERK1/2, 从而使得ERK1/2信号传导途径失活; RT-PCR法和Western blot法检测结果显示PD98059能够浓度依赖性(25-100 μmol/L)和时间依赖性(12-48 h)刺激培养的胃癌MGC803细胞RECK mRNA和蛋白表达增加, MMP-9 mRNA和蛋白表达下降.

结论: PD98059可以通过抑制ERK1/2信号途径, 上调RECK的表达, 下调MMP-9的表达, 从而抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖、生长.

Keywords: ERK1/2信号通路; 人胃癌细胞; RECK基因; 基质金属蛋白酶9; PD98059