修回日期: 2010-11-15
接受日期: 2010-11-23
在线出版日期: 2011-01-18
目的: 探讨乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病患者血清中小分子差异蛋白在HBV感染后病情发展过程中的意义.
方法: 采用蛋白芯片及表面增强激光解析电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, SELDI-TOF-MS)技术对已用乙腈去除高丰度蛋白的正常对照(NC)、乙型肝炎病毒携带者(ASCs)、慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)及原发性肝细胞癌(HCC)患者术前血清进行检测, 筛选各自的血清小分子差异表达蛋白, 并分别建立诊断模型. 在蛋白数据库expasy寻找相关差异蛋白信息, 对差异蛋白峰的可能结构及功能进行评价.
结果: 与NC组比, ASCs组有63个蛋白质波峰的强度值存在统计学差异(P<0.05), 其中29个上调, 34个下调; CHB组有57个, 其中21个上调, 36个下调; LC组有68个, 其中33个上调, 35个下调; HCC组有74个, 其中28个上调, 46个下调; 通过对比分析, 发现在4个病例组表达均为上调的m/z为15 889.8, 蛋白峰强度值在NC<ASC<CHB<LC组, HCC组较CHB和LC组低; 11 742.2蛋白峰强度值在NC<ASC<CHB<LC组和NC<ASC<CHB<HCC组, 在LC和HCC组最高, 用此蛋白峰诊断HBV感染相关性LC的灵敏度和特异度分别为90%和86.67%, 诊断HCC的灵敏度和特异度分别为93.33%和83.33%.
结论: 成功去除高丰度蛋白和应用SELDI-TOF-MS技术筛选HBV感染相关性肝病患者血清中小分子差异蛋白, m/z为8 709.7、13 759.8、14 004.0、15 361.89、16 072.3、2 746.8、3 449.1、3 941.06、4 098.3、9 445.5的10个蛋白峰可能与HBV感染有关; m/z为15 889.8的蛋白峰可能成为HBV感染后进展为LC早期诊断的标志物, 而m/z为11 742.2的蛋白峰也许是HBV相关性LC或HCC的一个重要标志.