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蟾蜍毒素对人胃癌细胞凋亡的诱导机制
王锴, 刘阳阳, 李恩泽, 哈敏文, 朱志图, 辽宁医学院附属第一医院肿瘤科 辽宁省锦州市 121001
郁云龙, 天津市海洋石油总院普内科 天津市 300452
王锴, 医师, 主要从事肿瘤内科治疗方面的研究.
基金项目: 辽宁省科技厅博士科研启动基金资助项目, No. 20091051.
作者贡献分布: 此课题由王锴与朱志图设计; 研究过程由王锴、郁云龙及刘阳阳操作完成; 数据分析由王锴与李恩泽完成; 实验室仪器由哈敏文提供.
通讯作者: 朱志图, 副教授, 博士, 硕士生导师, 121001, 辽宁省锦州市, 辽宁医学院附属第一医院肿瘤科. zhuzhitu@hotmail.com
电话: 0416-4197256
收稿日期: 2010-11-02
修回日期: 2010-12-01
接受日期: 2010-12-07
在线出版日期: 2011-01-18
修回日期: 2010-12-01
接受日期: 2010-12-07
在线出版日期: 2011-01-18
Abstract
目的: 研究蟾蜍毒素诱导人胃癌细胞MGC803凋亡及对凋亡因子Livin、caspase-3的影响.
方法: 应用MTT法检测10、20、40、80、160 nmol/L蟾蜍毒素对胃癌细胞MGC803增殖抑制作用; 瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞形态学的变化; 流式细胞术分析周期阻滞和细胞凋亡; Western blot法检测Livin、caspase-3蛋白的表达.
结果: (1)蟾蜍毒素抑制MGC803细胞增殖, 24、48及72 h的IC50分别为105.25 nmol/L、47.92 nmol/L、16.52 nmol/L; (2)10-80 nmol/L蟾蜍毒素能诱导胃癌细胞周期阻滞及凋亡, 形态学表现为出现凋亡小体; (3)流式细胞仪检测到80 nmol/L组亚二倍体凋亡峰(20.83%±2.72% vs 1.67%±0.46%, P = 0.006)及20 nmol/L组细胞周期G2/M期阻滞(37.81%±3.28% vs 20.66%±3.09%, P = 0.003); (4)Western blot显示蟾蜍毒素诱导细胞凋亡过程中, Livin蛋白表达分别下调到对照组的73.29%±6.23%, 60.10%±7.84%和34.70%±5.76%, 同时活化caspase-3.
结论: 蟾蜍毒素诱导胃癌细胞MGC803细胞凋亡可能与下调Livin蛋白、活化caspase-3蛋白有关.
Keywords: 蟾蜍毒素; 胃癌; 凋亡; Livin; caspase-3