基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-06-18; 19(17): 1785-1790
Published online 2011-06-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i17.1785
塞莱昔布对幽门螺杆菌蛋白质组的影响
高培培, 王蔚虹, 王静, 李江, 董欣红
高培培, 王蔚虹, 王静, 李江, 董欣红, 北京大学第一医院消化内科 北京市 100034
高培培, 硕士, 主要从事幽门螺杆菌相关疾病方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30770981.
作者贡献分布: 王蔚虹与高培培对此文所作贡献均等; 此课题由王蔚虹设计; 实验操作由高培培、王静、李江及董欣红完成; 数据分析由高培培与王蔚虹完成; 本论文写作由高培培与王蔚虹完成.
通讯作者: 王蔚虹, 教授, 100034, 北京市西城区西什库大街8号, 北京大学第一医院消化内科. wangweihong@medmail.com.cn
电话: 010-83572616 传真: 010-66518105
收稿日期: 2011-03-25
修回日期: 2011-05-07
接受日期: 2011-05-11
在线出版日期: 2011-06-18
Abstract

目的: 探讨选择性COX-2抑制剂塞莱昔布对幽门螺杆菌(H. pylori)蛋白质组的影响.

方法: 双向凝胶电泳技术(2-DE)分离塞莱昔布处理前后的H. pylori标准株26695全菌蛋白, 银染法凝胶染色, 图像扫描分析软件识别差异蛋白, 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALD-TOF-MS)、串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析差异蛋白; SYBR GreenⅠ实时定量PCR测定差异蛋白基因的表达变化.

结果: 塞莱昔布处理后, H. pylori标准株26695发现17个蛋白质斑点表达有差异. 7个蛋白质斑点得到阳性鉴定, 分别归为H. pylori的3种蛋白质: 热休克蛋白60(HSP60), 即groEL, 延伸因子(EF-TU), 谷氨酰转肽酶(GGT). 与DMSO溶媒对照相比, 塞莱昔布处理后的H. pylori HSP60(groEL)、EF-TU、GGT表达下调. 实时定量PCR测定显示, 编码H. pylori EF-TU、GGT基因的mRNA水平降低(0.07±0.06 vs 1.01±0.16; 0.31±0.13 vs 0.98±0.01, 均P<0.05), 而编码H. pylori HSP60(groEL)基因的mRNA水平增加(1.85±0.26 vs 1.07±0.27, P<0.05).

结论: 塞莱昔布通过下调H. pylori EF-TU、GGT mRNA的表达减低其蛋白的表达; 而其对HSP60蛋白质表达的下调作用不发生在mRNA转录水平. 塞莱昔布可能通过调节H. pylori致病相关蛋白的表达影响其致病性.

Keywords: 幽门螺杆菌; 塞莱昔布; 蛋白质组