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世界华人消化杂志. 2011-06-08; 19(16): 1674-1679
Published online 2011-06-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i16.1674
Published online 2011-06-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i16.1674
小鼠肝癌细胞肺高转移株的建立及鉴定
王士勇, 张璐, 张晖, 杜微丽, 张哲, 王佳玲, 武秀艳, 何英, 曾雪, 中国医科大学附属第四医院生物治疗科 辽宁省沈阳市 110032
王士勇, 刘畅, 焦雪, 中国医科大学附属第四医院生物治疗实验室 辽宁省沈阳市 110032
王士勇, 主任医师, 主要从事肿瘤生物治疗和干细胞移植方面的研究.
基金项目: 教育部归国博士启动课题基金资助项目, No. 2004-527.
作者贡献分布: 王士勇与张璐对此文所作贡献均等; 此课题由王士勇与张璐设计;张璐、张晖、杜微丽、张哲、王佳玲及何英等完成实验操作; 王士勇提供经费、指导实验过程及结果分析; 本论文写作由张璐与王士勇完成.
通讯作者: 王士勇, 主任医师, 110032, 辽宁省沈阳市皇姑区崇山东路4号, 中国医科大学附属第四医院生物治疗科. sywang66@yahoo.com
电话: 024-62043335 传真: 024-62571119
收稿日期: 2011-03-18
修回日期: 2011-05-17
接受日期: 2011-05-24
在线出版日期: 2011-06-08
修回日期: 2011-05-17
接受日期: 2011-05-24
在线出版日期: 2011-06-08
Abstract
目的: 建立小鼠肝癌细胞肺高转移株, 为研究转移相关分子机制提供合适的模型.
方法: 将H22肝癌腹水瘤细胞(简称M0)经尾静脉注入昆明小鼠, 获取肺转移结节, 再制备腹水瘤、尾静脉注射、形成肺转移瘤. 重复操作获得第4代肺高转移株(简称M4), 检测其小鼠肺转移能力和体外增殖能力、细胞分裂指数、染色体形态及细胞周期比例, 并用RT-PCR方法测定RhoC基因mRNA的表达来进一步加以验证.
结果: 经尾静脉注射, M4较早出现肺转移, 肺转移结节数多、体积大. M4与M0体外结果比较: 倍增时间缩短了38.73%; 细胞分裂指数是4.11%±0.11%, 明显多于M0的4.70%±0.19%(P = 0.014); S期比例是56.10±4.76%, 明显高于M0的46.98±4.49%(P = 0.022); 二者染色体数目相同, 但M4异型性明显; RhoC基因表达分别是1.011±0.163和0.486±0.045, M4的表达显著增高(P = 0.0029).
结论: 建立了小鼠肝癌细胞肺高转移细胞株, 其RhoC基因表达明显上调.
Keywords: 肝癌; 肺转移; 小鼠; 细胞株; RhoC