Published online 2011-06-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i16.1666
修回日期: 2011-04-20
接受日期: 2011-04-21
在线出版日期: 2011-06-08
目的: 探讨内皮祖细胞(EPCs)在大鼠肝癌模型形成中的作用.
方法: 分离培养大鼠EPCs, 体外用4', 6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记后, 将EPCs-DAPI制成1×105/150 μL, 2×105/150 μL, 4×105/150 μL的低、中、高浓度悬液, 模型组和EPCs移植组的SD大鼠腹腔注射二乙基亚硝胺(DEN)制成肝癌模型, 空白组注射等量的生理盐水, EPCs移植组经尾静脉注射低、中、高浓度EPCs-DAPI悬液1 mL, 空白组和模型组经尾静脉注射生理盐水1 mL, 分别于第4、6、8周末处死, 留取血清和肝脏组织标本, 检测EPCs标志物CD34、CD133和KDR表达, 检测各组血清ALT、AST、AFP的表达, 观察EPCs-DAPI表达的量及分布的变化, 并用Imagepro plus图像分析软件对EPCs-DAPI表达的阳性区域面积(PA)作半定量分析.
结果: 培养的细胞7 d后检测细胞表面标志物CD34、CD133和KDR的表达均呈阳性, 低浓度EPCs移植4 wk组较ALT、AST、AFP模型对照4 wk组显著升高(P<0.01); 中浓度EPCs移植6 wk组较ALT、AST、AFP模型对照6 wk组显著升高(P<0.01); 高浓度EPCs移植8 wk组较ALT、AST、AFP模型对照8 wk组显著升高(P<0.01); EPCs移植组中DAPI均呈阳性, 且依注射EPCs悬液浓度高低和时间长短呈上升趋势, 表达逐渐增强, 在视野中密集分布, 染色渐深. EPCs低、中、高浓度移植4 wk组, EPCs低、中、高浓度移植6 wk组和EPCs低、中、高浓度移植8 wk组PA值比较, 差异具有显著性(P<0.05); 低浓度EPCs移植 4、6、8 wk组, 中浓度EPCs移植4、6、8 wk组和高浓度EPCs移植4、6、8 wk组PA值比较, 差异无显著性.
结论: EPCs在肝癌形成过程中对肝功能有影响, 且随着造模时间的延长而加重. EPCs在肝癌形成过程中有促进作用. EPCs体内示踪在肝组织的分布和表达水平表明其对肝癌有靶向作用.