基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-05-28; 19(15): 1561-1567
Published online 2011-05-28. doi: 10.11569/wcjd.v19.i15.1561
丹参酮ⅡA调节COX-2对人结肠癌HCT-116细胞VEGF表达的影响
周利红, 王炎, 范忠泽, 吴琼, 刘宣, 慈书俊, 李琦
周利红, 王炎, 范忠泽, 吴琼, 刘宣, 慈书俊, 李琦, 上海中医药大学附属普陀医院 上海中医药大学中西医结合肿瘤介入研究所 上海市 200062
周利红, 硕士, 主要从事中西医结合防治肿瘤的临床及基础研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 810729552; 上海市科委实验动物专项基金资助项目, No. 10140902600; 上海市自然基金资助项目, No. 09ZR1428500; 上海市重点学科基金资助项目, No. S30302; 上海市教委科研预算内基金资助项目, No. 09JW42.
作者贡献分布: 本课题由李琦与范忠泽设计; 研究过程由周利红、王炎、吴琼、刘宣及慈书俊共同完成; 研究所用新试剂及分析工具由李琦与范忠泽提供; 数据分析由吴琼与刘宣共同完成; 本论文写作由李琦、周利红及王炎完成.
通讯作者: 李琦, 博士, 副教授, 副主任医师, 硕士生导师, 200062, 上海市兰溪路164号, 上海中医药大学附属普陀医院, 上海中医药大学中西医结合肿瘤介入研究所. lzwf@hotmail.com
收稿日期: 2011-01-05
修回日期: 2011-04-18
接受日期: 2011-04-26
在线出版日期: 2011-05-28
Abstract

目的: 研究中药丹参有效活性成分丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用及其调控COX-2对HCT-116细胞VEGF表达的影响.

方法: 利用MTT法检测不同浓度的TanⅡA对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用, 将pGL3-Basic-COX-2-promoter重组质粒和pRL-TK内参质粒共转染HCT-116细胞, 分为空白组、对照组和TanⅡA组. 药物作用48 h后, 双荧光素酶测定法检测COX-2启动子转录活性. 将含COX-2 CDS序列的pIRESI-COX-2重组质粒转染HCT-116细胞, 分为空白组、对照组和TanⅡA组, ELISA法检测细胞培养液中VEGF的表达.

结果: TanⅡA对人结肠癌HCT-116细胞有明显的增殖抑制作用, 24、48、72 h的IC50值分别为40.3 μmol/L±5.22 μmol/L, 12.9 μmol/L ±3.24 μmol/L, 8.5 μmol/L±1.47 μmol/L, 24 h的最大无毒剂量为10 μmol/L. 转染pGL3-Basic-COX-2-promoter重组质粒48 h后, COX-2启动子活性明显上调(对照组 vs 空白组, P<0.01), 而不同浓度的TanⅡA可明显抑制COX-2启动子活性. 转染pIRESI-COX-2重组质粒后, 细胞培养液VEGF浓度升高(对照组 vs 空白组, P<0.05), 而10 μmol/L TanⅡA处理后, VEGF的表达显著下调(TanⅡA vs 对照组, P<0.05).

结论: TanⅡA能明显抑制人结直肠癌细胞增殖, 并通过调控人结肠癌细胞COX-2表达抑制结直肠癌细胞VEGF的表达.

Keywords: 丹参酮ⅡA; 环氧合酶2; 血管内皮生长因子; 结肠癌