Published online 2011-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i13.1411
修回日期: 2011-04-13
接受日期: 2011-04-26
在线出版日期: 2011-05-08
目的: 探讨microRNA(miR)-145是否通过调控c-Myc参与肝癌行为的调控.
方法: 实时定量PCR检测肝组织及细胞系miR-145表达水平; 检测不同肝组织c-Myc的mRNA和蛋白表达量; 通过转染上调miR-145在HepG2细胞表达后, 检测转染前后空白组、实验组、阴性对照组HepG2中c-Myc的mRNA和蛋白表达量; 应用流式细胞仪检测转染前后各组HepG2的凋亡情况.
结果: miR-145 mRNA在正常肝组织中表达明显高于癌旁和肝癌组织(0.878±0.146 vs 0.265±0.084, 0.271±0.096, 均P<0.05); 癌旁和肝癌组织中miR-145 mRNA的表达量差别无统计学意义. miR-145 mRNA在LO-2中的表达明显高于HepG2(0.755±0.185 vs 0.471±0.074, P<0.05). c-Myc mRNA和蛋白在癌旁和肝癌中表达均高于正常肝组织(mRNA: 0.136±0.071, 0.451±0.026 vs 0.029±0.023; 蛋白: 0.301±0.022, 0.445±0.018 vs 0.137±0.011, 均P<0.05), 且在肝癌组织中表达量较癌旁组织中明显升高(P<0.05). 转染miR-145 mimics后空白组、实验组、阴性对照组c-Myc mRNA表达差异无统计学意义; 而相对于空白组和阴性对照组, 实验组c-Myc蛋白表达量表达明显下降(0.146±0.011 vs 0.366±0.014, 0.350±0.013, 均P<0.05), 空白组和阴性对照组之间差异无统计学意义. 流式细胞术检测发现, 在HepG2中上调miR-145的表达后, 细胞的凋亡明显增多, 实验组与空白组和阴性对照组之间有明显差异(3.000±0.100 vs 1.167±0.153, 0.933±0.208, 均P<0.05).
结论: miR-145反向调节c-Myc的表达; 表达下调的miR-145丧失对c-Myc的抑制可能是肝癌发生的重要机制; miR-145能够作为抑癌基因促进细胞凋亡.