基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-05-08; 19(13): 1342-1346
Published online 2011-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i13.1342
siRNA沉默Bmi-1表达对胰腺癌PANC-1细胞增殖的抑制作用
冷政伟, 殷涛, 夏清华, 张万里, 王国斌, 陶凯雄
冷政伟, 殷涛, 夏清华, 张万里, 王国斌, 陶凯雄, 华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科 湖北省武汉市 430022
冷政伟, 在读博士, 主要从事消化系统疾病的研究.
作者贡献分布: 本课题实验操作及本文撰写由冷政伟完成; 本课题由殷涛设计; 夏清华提供了实验指导和分析工具; 陶凯雄与王国斌对文章提出了批评性审阅及部分实验试剂; 数据分析由张万里完成.
通讯作者: 陶凯雄, 教授, 主任医师, 430022, 湖北省武汉市, 华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科. tao_kaixiong@163.com
收稿日期: 2010-12-06
修回日期: 2011-04-14
接受日期: 2011-04-26
在线出版日期: 2011-05-08
Abstract

目的: 探讨运用RNAi技术沉默Bmi-1基因对人胰腺癌细胞恶性行为的影响, 为胰腺癌基因治疗提供新的靶点和思路.

方法: 构建反义Bmi-1真核表达载体转染人胰腺癌PANC-1细胞, 运用荧光显微镜下观察、MTT、Western blot、流式细胞术检测转染效果及细胞周期、凋亡变化.

结果: 成功构建反义Bmi-1真核表达载体并且转染后细胞Bmi-1表达明显下降(175.39±1.76 vs 318.54±3.53, P<0.05), 实验组细胞与对照组相比, 增殖受到抑制, 周期出现阻滞(G0/G1: 60.480%±1.545% vs 40.520%±2.865%; S: 12.68%±2.654% vs 35.740%±2.074%, 均P<0.05), 凋亡明显增加(21.670%±2.948% vs 7.870%±0.900%, P<0.05).

结论: Bmi-1的siRNA能明显抑制Bmi-1的表达, 抑制细胞增殖, 促进细胞凋亡. Bmi-1可作为胰腺癌基因治疗的靶点.

Keywords: 胰腺癌; B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1; 小干扰RNA; 流式细胞术