Published online 2011-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v19.i12.1244
修回日期: 2011-03-29
接受日期: 2011-04-11
在线出版日期: 2011-04-28
目的: 探讨吴茱萸碱(EVO)联合CDK1的特异抑制剂RO3306对鼠结肠癌细胞CT26的生长抑制、诱导凋亡是否有协同增效作用.
方法: 采用MTT法求出EVO对CT26作用24 h的IC50及诱导CT26细胞发生不可逆凋亡的时间点, 比较EVO和RO3306同时用药与序贯用药(EVO先作用24 h, 再加入RO3306共同作用6 h)对CT26细胞的抑制作用. 采用金正均q值法检验其联合作用是否有协同性(q为实际药效与理论药效比值, q>1.15为协同性). 同时用药实验与序贯用药实验的分组情况均为对照组、2 mg/L EVO组, 4 mg/L EVO组, 15 mg/L RO3306组(加药时间同相应联合组), 2 mg/L EVO+15 mg/L RO3306联合组, 4 mg/L EVO+15 mg/L RO3306联合组. 采用克隆集落形成法检测药物单独和联合作用下对CT26细胞的抑制率. 采用流式细胞术检测药物作用对CT26凋亡率的影响.
结果: MTT法结果显示EVO对结肠癌细胞CT26具有显著抑制作用, 其抑制作用有明显的浓度依赖性, 作用24 h的IC50为10.8 mg/L; EVO诱导CT26细胞进入不可逆凋亡的时间点在24 h左右. MTT检测EVO和RO3306序贯用药的各组抑制率依次分别是22.0%±4.4%、30.4%±3.2%、12.3%±4.8%、48.0%±3.2%、62.2%±2.2%(序贯用药联合组q = 1.52, 1.60>1.15, 同时加药联合组q = 0.68, 0.72). 克隆集落形成法显示相应各组的抑制率依次分别是9.7%±5.8%、38.9%±3.8%, 10.8%±3.7%, 29.8%±10.7%, 68.3%±12.7%(q>1.15). 流式细胞术显示各组细胞凋亡率依次分别是5.5%±1.1%, 18.3%±1.9%, 25.6%±1.5%, 9.2%±1.1%, 39.1%±9.8%, 54.6%±1.2%(q>1.15).
结论: EVO能抑制鼠结肠癌细胞CT26的生长, 其作用呈剂量依赖关系, EVO诱导CT26发生不可逆凋亡的时间点约在24 h左右; EVO联合CDK1抑制剂RO3306并序贯用药对CT26的抑制作用具有协同增效效应, 同时加药联合作用未显示协同性.