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世界华人消化杂志. 2011-04-18; 19(11): 1169-1173
Published online 2011-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i11.1169
Published online 2011-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i11.1169
脂联素对LX-2细胞COL-Ⅰ表达的调节及其机制
刘殿刚, 李非, 刘家峰, 孙家邦, 首都医科大学宣武医院普外科 北京市 100053
张育先, 北京市回民医院消化科 北京市 100054
作者贡献分布: 此课题由刘殿刚、张育先、李非、刘家峰及孙家邦设计; 研究过程中由李非、刘家峰及孙家邦指导; 刘殿刚与张育先操作完成; 数据分析由张育先完成; 刘殿刚与张育先完成论文写作.
通讯作者: 刘殿刚, 100053, 北京市, 首都医科大学宣武医院普外科. liudiangang01@gmail.com
收稿日期: 2010-12-07
修回日期: 2011-03-14
接受日期: 2011-03-23
在线出版日期: 2011-04-18
修回日期: 2011-03-14
接受日期: 2011-03-23
在线出版日期: 2011-04-18
Abstract
目的: 研究全长脂联素真核表达质粒对体外培养人类肝星状细胞株(LX-2)细胞, Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ, COL-Ⅰ)基因及蛋白的影响, 探讨全长脂联素对细胞凋亡的作用及其调节COL-Ⅰ表达的作用机制.
方法: 实验分为对照组、空质粒组、全长脂联素真核表达质粒组, 各组转染48 h后Real-time PCR方法检测COL-Ⅰ mRNA的表达, ELISA法检测COL-Ⅰ蛋白水平的表达, MTT检测细胞存活率变化, AnnexinV-FITC检测细胞凋亡率变化, Western blot检测细胞凋亡蛋白caspase-3的变化.
结果: 与空质粒组及对照组相比, 全长脂联素真核表达质粒组COL-Ⅰ mRNA及蛋白的表达下降(179.00 ng/L±16.83 ng/L vs 532.30 ng/L±27.52 ng/L, 570.00 ng/L±16.12 ng/L, 均P<0.01), 细胞存活率下降(65.70%±1.56% vs 93.15%±1.90%, 95.82%±2.52%, 均P<0.01), 凋亡率增加(14.70%±2.34% vs 1.60%±0.23%, 1.80%±0.15%, 均P<0.01), caspase-3活性蛋白的表达增加(0.62±0.09 vs 0.21±0.04, 0.22±0.07, 均P<0.01).
结论: 脂联素可下调LX-2细胞COL-Ⅰ表达而抑制肝纤维化, 其机制可能是通过抑制LX-2细胞增殖及增加caspase-3蛋白的途径促进其凋亡.
Keywords: 脂联素; 肝星状细胞; Ⅰ型胶原; 肝硬化