基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-04-08; 19(10): 1028-1033
Published online 2011-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i10.1028
丹参酮ⅡA对人胰腺癌细胞凋亡的诱导作用及其对SAPK/JNK信号转导通路的影响
王炎, 李琦, 范忠泽, 王忆勤, 邱艳艳, 靳宝辉, 陈星竹, 殷佩浩
王炎, 李琦, 范忠泽, 靳宝辉, 陈星竹, 上海中医药大学附属普陀医院肿瘤科 上海市 200062
王忆勤, 上海中医药大学基础医学院 上海市 201203
邱艳艳, 殷佩浩, 上海中医药大学附属普陀医院普外科 上海市 200062
王炎, 博士, 主要从事中医药治疗肿瘤方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81001594;上海市教育委员会科研基金资助项目, No. 07cz014;上海市科委自然基金资助项目, No. 09ZR1428500;上海市重点学科基金资助项目, No. S30302.
作者贡献分布: 此课题由李琦与王炎设计; 研究过程由殷佩浩与王炎操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由范忠泽与王忆勤提供; 数据分析由邱艳艳、靳宝辉及陈星竹完成; 本论文写作由殷佩浩与王炎完成.
通讯作者: 殷佩浩, 200062, 上海市普陀区兰溪路164号, 上海中医药大学附属普陀医院普外科. yinpeihao1975@hotmail.com
电话: 021-62572723-4305 传真: 021-62161216
收稿日期: 2010-12-11
修回日期: 2011-03-14
接受日期: 2011-03-23
在线出版日期: 2011-04-08
Abstract

目的: 研究丹参酮ⅡA诱导人胰腺癌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的JNK信号转导通路, 揭示其抗胰腺癌的部分机制.

方法: MTT法观察丹参酮ⅡA对人胰腺癌PANC-1细胞的生长抑制作用; 8、16、32 mg/L丹参酮ⅡA分别作用人胰腺癌PANC-1细胞48 h后, 免疫荧光染色观察细胞凋亡情况; 流式细胞仪法(FCM)检测细胞凋亡; Western blot检测丹参酮ⅡA作用PANC-1细胞后SAPK/JNK信号通路的激活情况, 荧光定量PCR检测Survivin基因mRNA的表达水平; 并比较阻断JNK信号通路后, 丹参酮ⅡA对胰腺癌细胞凋亡Survivin基因mRNA的表达.

结果: MTT法测得丹参酮ⅡA对人胰腺癌PANC-1细胞的生长抑制率均有显著的抑制作用, 其作用与剂量和作用时间成正相关; 丹参酮ⅡA作用48 h后, 荧光显微镜下观察到经Hoechst染色的典型凋亡细胞. 8、16、32 mg/L浓度丹参酮ⅡA作用人胰腺癌细胞后的细胞凋亡率分别为8.83%±1.51%, 12.86%±2.70%和21.24%±2.58%, 与对照组(0.63%±0.18%)比较, 均有显著性差异(均P<0.01); 阻断JNK信号通路后, 凋亡率明显降低(P<0.01). 丹参酮ⅡA作用人胰腺癌细胞1 h后JNK信号通路被激活, 4 h达峰值. 16 mg/L丹参酮ⅡA作用人胰腺癌细胞48 h后, Survivin mRNA的表达明显下降, 分别为正常细胞的0.61, 0.39, 0.10倍; 阻断JNK信号通路后, 丹参酮ⅡA作用人胰腺癌细胞的Survivin mRNA的表达明显上升.

结论: 丹参酮ⅡA能诱导人胰腺癌PANC-1细胞株凋亡. 通过JNK信号转导通路下调Survivin mRNA的表达可能是其诱导胰腺癌细胞凋亡的重要机制.

Keywords: 丹参酮ⅡA; 胰腺癌; 凋亡; SAPK/JNK; 信号转导; 生存素