基础研究
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世界华人消化杂志. 2010-02-28; 18(6): 542-549
Published online 2010-02-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i6.542
芹菜素对肝癌细胞生长及基因表达的影响
蔡婧, 刘安文, 赵向丽, 张树辉
蔡婧, 刘安文, 南昌大学第二附属医院肿瘤科 江西省南昌市 330006
赵向丽, 张树辉, 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院病理科 上海市 200437
蔡婧, 2007年南昌大学硕士, 主要从事中药治疗肿瘤的研究.
基金项目: 上海市科委自然科学基金资助项目, No. 08ZR1419600;上海市教委重点研究基金资助项目, No. 08ZZ123.
作者贡献分布: 此课题由刘安文与张树辉设计; 研究过程由蔡婧与赵向丽操作完成; 数据分析由张树辉完成; 本论文写作由蔡婧与张树辉完成.
通讯作者: 刘安文, 副教授, 330006, 江西省南昌市, 南昌大学第二附属医院肿瘤科. awliu666@163.com
收稿日期: 2009-12-14
修回日期: 2010-01-15
接受日期: 2010-01-19
在线出版日期: 2010-02-28
Abstract

目的: 探讨芹菜素(apigenin)对Huh-7肝癌细胞生长及基因表达的影响.

方法: 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测芹菜素对Huh-7细胞增殖、克隆形成、周期及凋亡的影响; 通过动物模型观察芹菜素对裸鼠人肝癌Huh-7移植瘤肿瘤质量及体积的影响; 采用基因芯片技术检测芹菜素作用前后Huh-7细胞全基因组序列, 分析其基因表达差异; 采用qRT-PCR、Western blot技术验证基因芯片结果.

结果: 与对照组相比, 不同浓度的芹菜素(5、10、20 mg/L)处理Huh-7细胞后, 芹菜素对Huh-7细胞的生长有显著的抑制作用(IC50 = 10.5 mg/L±0.3 mg/L). 细胞周期阻滞于G2/M期、降低G0-G1期细胞的比例、并促进细胞凋亡和抑制移植瘤的生长. 全基因芯片发现芹菜素可改变Huh-7细胞中1 764个功能性基因的表达. 在这些差异表达的基因中, 大多数与核酸结合、转运、接触和酶调节活性、转录调节、细胞骨架结构和黏附、信号转导、代谢、凋亡以及免疫反应等有关. 其中最重要的发现是芹菜素显著下调IL-4R和USP18基因表达, qRT-PCR、Western blot检测结果与芯片结果相符.

结论: 芹菜素可能通过阻滞细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡从而抑制体内体外Huh-7细胞的生长, 并影响多种基因的表达.

Keywords: 芹菜素; Huh-7; 肝癌细胞; 白介素4受体; USP18; cDNA芯片