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TIMP3、E-Cadherin基因在食管癌细胞系EC1和EC9706中的甲基化及蛋白表达
赵璇, 李沛, 马俊芬, 赵继敏, 杨洪艳, 董子明, 郑州大学基础医学院病理生理教研室 河南省郑州市 450052
基金项目: 河南省高校科技创新人才支持计划基金资助项目, No. 2009HAST1T001;郑州大学优秀研究生培育基金资助项目, No. A121.
作者贡献分布: 赵璇与李沛对此文所作贡献均等; 此课题由李沛与董子明设计; 研究过程由赵璇与李沛操作完成; 实验中得到马俊芬、赵继敏及杨洪艳技术支持; 数据分析及论文写作由李沛、赵璇及董子明完成.
通讯作者: 董子明, 教授, 450052, 河南省郑州市科学大道100号, 郑州大学基础医学院病理生理教研室. dongzm@zzu.edu.cn
电话: 0371-67781957
收稿日期: 2009-11-06
修回日期: 2009-12-13
接受日期: 2009-12-21
在线出版日期: 2010-02-08
修回日期: 2009-12-13
接受日期: 2009-12-21
在线出版日期: 2010-02-08
Abstract
目的: 观察食管癌细胞系EC1和EC9706中TIMP3、E-Cadherin基因甲基化的水平及蛋白表达, 以及去甲基化药物5-Aza-CdR对其的影响.
方法: 应用甲基化特异性PCR(MSP)和免疫细胞化学的方法, 分别检测体外培养的食管癌细胞系EC1和EC9706中TIMP3和E-Cadherin基因甲基化水平及蛋白表达. 用5 μmol/L 5-Aza-CdR处理两种细胞系后, 用同样的方法检测其甲基化水平及蛋白表达, 观察药物的影响.
结果: TIMP3基因在食管癌细胞系EC1和EC9706中均表现为非甲基化, 蛋白呈现弱表达; 而E-Cadherin基因在EC1中发生甲基化, EC9706中发生半甲基化, 蛋白表达均缺失. 5-Aza-CdR作用后的两种细胞系中, TIMP3基因仍为非甲基化, 而蛋白表达似有所曾强; 但E-Cadherin基因甲基化得到了逆转, 蛋白表达由原来的不表达, 转变为强表达.
结论: 5-Aza-CdR能够有效逆转E-Cadherin基因甲基化, 并使其蛋白恢复表达; TIMP3基因的失活似与甲基化机制无关, 5-Aza-CdR对其蛋白表达的恢复作用微弱.
Keywords: 食管癌; 甲基化; 5-Aza-CdR; TIMP3; E-Cadherin