PPARγ、NF-κB的表达与砷暴露致大鼠肝纤维化的相关性

Abstract

目的: 初步探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、核转录因子B(NF-κB)的表达与水砷暴露致大鼠肝纤维化的相关性.

方法: 110只SD大鼠随机分成对照组(自来水)、模型组(浓度100 mg/L亚砷酸钠溶液)、自然恢复组(浓度100 mg/L亚砷酸钠溶液+自来水). 对照组和模型组分别于第l、2、3、4月末各处死10只, 自然恢复组先给予砷溶液, 分别在第l、2、3月末取出10只改给予1 mo自来水饮用后处死. 肝组织病理学检查以观察肝纤维化的动态变化, 实时荧光定量RT-PCR法和Western blot法检测PPARγ、NF-κB的mRNA及蛋白表达水平.

结果: (1)病理结果: HE染和Masson染色可见, 随砷暴露时间的延长, 肝细胞变性、坏死增多, 汇管区炎症细胞浸润加重, 纤维组织增生增多, 肝纤维化趋势明显. 砷暴露1 mo脱离自然恢复1 mo后较同月模型组肝细胞变性、坏死及炎细胞浸润程度明显减轻, 胶原生成减少. 砷暴露2、3 mo脱离自然恢复1 mo后较同月模型组病理结果差异不明显; (2)mRNA水平: 模型组PPARγ mRNA含量逐渐降低, 与对照组比较差异均有统计学意义(174.99±41.48, 114.55±21.30, 64.67±9.83, 19.20±16.10 vs 218.40±47.85, P<0.05), 砷暴露1、2、3 mo后分别自然恢复1 mo大鼠肝组织中PPARγ mRNA表达均低于同月造模组, 仅砷暴露1 mo自然恢复组1 mo组PPARγ mRNA降低有统计学意义(174.99±41.48 vs 215.97±45.96, P<0.05); 模型组NF-κB mRNA含量逐渐升高, 与对照组比较差异均有统计学意义(65.58±13.17, 90.23±15.68, 117.95±18.19, 172.86±32.92 vs 30.84±15.24,P<0.05), 砷暴露1、2、3 mo后分别自然恢复1 mo大鼠肝组织中NF-κB mRNA表达均高于同月造模组, 仅砷暴露1 mo自然恢复组1 mo组NF-κB mRNA升高有统计学意义(65.58±13.17 vs 40.45±19.56, P<0.05); (3)蛋白水平: 模型组大鼠肝组织中PPARγ的蛋白含量表达均低于对照组, 造模3、4 mo组与造模1 mo组比较差异有统计学意义(0.63±0.06, 0.55±0.11 vs 0.85±0.08,P<0.05); 模型组大鼠肝组织中NF-κB的蛋白含量均高于对照组, 造模3、4 mo组与造模1 mo组比较差异有统计学意义(3.25±0.89, 4.27±1.26 vs 1.6±0.57, P<0.05); (4)PPARγ和NF-κB的相关性: 两者mRNA的表达呈负相关(r = 0.847,P<0.01), 两者蛋白表达也呈负相关(r = 0.529, P<0.05).

结论: 肝纤维化程度随砷暴露时间延长而加重, 越早脱离砷环境, 肝损伤自然恢复越快; 砷暴露时间越长, PPARγ mRNA及蛋白表达越低, NF-κB mRNA及蛋白表达越高, 二者存在一反馈抑制通路; PPARγ-NF-κB信号传导通路参与砷暴露致肝纤维化形成机制.

Keywords: 砷暴露; 肝纤维化; 过氧化物酶体增殖物激活受体γ; 核转录因子κB