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世界华人消化杂志. 2010-12-28; 18(36): 3843-3847
Published online 2010-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i36.3843
Published online 2010-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i36.3843
5-氮杂-2'-脱氧胞苷对人胃癌SGC-7901细胞株生长及EDNRB基因启动子异常甲基化的影响
吴川清, 韩高雄, 帅晓明, 陶凯雄, 华中科技大学同济医学院附属协和医院腔镜外科 湖北省武汉市 430022
吴川清, 在读硕士, 主要从事胃肠道肿瘤和先天性疾病方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30872473.
作者贡献分布: 此课题由陶凯雄设计; 研究过程由吴川清与韩高雄操作完成; 研究所用试剂及分析工具由陶凯雄提供; 数据分析由吴川清与帅晓明完成; 本论文写作由吴川清与陶凯雄完成.
通讯作者: 陶凯雄, 博士, 主任医师, 博士生导师, 430022, 湖北省武汉市, 华中科技大学同济医学院附属协和医院腔镜外科. kaixgtao@public.wh.hb.cn
电话: 027-85351619
收稿日期: 2010-09-27
修回日期: 2010-11-19
接受日期: 2010-11-23
在线出版日期: 2010-12-28
修回日期: 2010-11-19
接受日期: 2010-11-23
在线出版日期: 2010-12-28
Abstract
目的: 探讨去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人胃癌细胞系SGC-7901细胞株的生长及EDNRB基因启动子异常甲基化的影响.
方法: 使用1、2、5、10 μmol/L 5-Aza-CdR干预胃癌SGC-7901细胞, 甲基化特异性PCR(MSP)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测药物干预前后EDNRB基因的甲基化状态和EDNRB mRNA的表达, MTT法检测细胞增殖活性, 流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡的改变.
结果: 未经5-Aza-CdR处理的SGC-7901细胞中EDNRB基因启动子区域CpG岛高甲基化, 且EDNRB mRNA不表达, 经1、2、5、10 μmol/L 5-Aza-CdR处理4 d后, EDNRB基因启动子区域高甲基化状态得到逆转, 细胞中EDNRB mRNA表达恢复. 4种浓度5-Aza-CdR处理的SGC-7901细胞后, 细胞增殖受到抑制, 且呈时间和剂量依赖性; 并抑制SGC-7901细胞生长周期, 其细胞周期阻滞于S期, 5、10 μmol/L 5-Aza-CdR实验组细胞凋亡率显著高于对照组, 且差异有统计学意义(7.13%±0.87%, 13.34%±1.12% vs 3.69%±0.52%, P = 0.032, P<0.001).
结论: 5-Aza-CdR能有效逆转人胃癌SGC-7901细胞EDNRB基因的异常甲基化, 从而激活因高甲基化导致EDNRB基因沉默的再转录, 诱导该基因的表达, 抑制该细胞的生长.
Keywords: 5-氮杂-2'-脱氧胞苷; 胃癌; 细胞株; 内皮素B受体; 基因; 甲基化