研究快报
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世界华人消化杂志. 2010-12-08; 18(34): 3679-3684
Published online 2010-12-08. doi: 10.11569/wcjd.v18.i34.3679
UW液、Celsior液和HTK液零下非结冰保存生物人工肝用L-02细胞的效果比较
李运田, 李庆勇, 张清华, 沙杭, 杜大勇, 马建新, 柳杨, 王芳, 黄海, 高毅
李运田, 李庆勇, 张清华, 沙杭, 杜大勇, 马建新, 柳杨, 王芳, 黄海, 中国人民解放军305医院老年病中心 北京市 100017
高毅, 南方医科大学珠江医院肝胆二科 广东省广州市 510262
基金项目: 国家高技术研究发展计划(863计划)基金资助项目, No. 2006AA02A141; 全军医学科研"十一五"计划专项基金资助项目, No. 08Z017.
作者贡献分布: 李运田与李庆勇对此文所作贡献均等; 此课题由李运田、沙杭、张清华及高毅设计; 研究过程在李运田指导下,由李庆勇完成; 生化指标检测由杜大勇完成; 流式细胞术由马建新完成; 统计分析由柳杨、王芳及黄海完成; 论文写作由李庆勇完成; 李运田审校.
通讯作者: 张清华, 教授, 100017, 北京市西城区文津街甲13号, 中国人民解放军305医院老年病中心. mdlqy@yahoo.com.cn
电话: 010-63096916 传真: 010-63096916
收稿日期: 2010-09-01
修回日期: 2010-10-15
接受日期: 2010-10-18
在线出版日期: 2010-12-08
Abstract

目的: 比较零下非结冰(-0.8 ℃)UW液、Celsior液和HTK液保存生物人工肝用L-02细胞的效果.

方法: 将制备好的L-02细胞悬液分成以下3组: UW液保存组(UW液组); Celsior液保存组(CS液组); HTK液保存组(HTK液组). 各组细胞于-0.8 ℃低温保存72 h后, 分别使用流式细胞术测定细胞存活率及死亡率, 谷丙转氨酶(ALT)及乳酸脱氢酶(LDH)释放, 尿素合成功能及白蛋白分泌功能.

结果: UW液较Celsior液和HTK液显著提高了零下非结冰保存72 h的L-02细胞的存活率(71.10%±4.09% vs 65.22%±4.45%, 50.48% ±5.13%, 均P<0.05); 降低了细胞死亡率(29.90%±4.09% vs 34.78%±4.45%, 49.52%±5.13%, 均P<0.05); 抑制了ALT(6.18 U/L±1.36U/L vs 8.15 U/L±1.14 U/L, 9.75 U/L±2.45U/L, 均P<0.05)和LDH(93.82 U/L±5.68U/L vs 115.67 U/L±8.77 U/L, 164.92 U/L±15.95 U/L, 均P<0.05)释放; 更好地维持了L-02细胞尿素合成功能(1.08 mmol/L±0.22 mmol/L vs0.92 mmol/L±0.17 mmol/L, 0.68 mmol/L±0.08 mmol/L, 均P<0.05)和白蛋白分泌功能(9.33 mg/L±1.36 mg/L vs 7.54 mg/L ±1.22 mmol/L, 7.18 mg/L±0.93 mg/L, 均P<0.05).

结论: 同Celsior液和HTK液相比, 使用UW液零下非结冰(-0.8 ℃)保存肝细胞可以明显提高复温后细胞存活率, 降低低温损伤引起的ALT、LDH释放, 有效保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能.

Keywords: 生物人工肝; 零下非结冰; UW液; Celsior液; HTK液