修回日期: 2009-12-18
接受日期: 2009-12-21
在线出版日期: 2010-01-28
目的: 观察低氧环境下不同浓度的丹参酮ⅡA(TanⅡA)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的影响及与HIF-1α和突变型P53的表达.
方法: 用氯化钴(CoCl2)创建低氧模型, 采用0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mg/L的TanⅡA联合10.0 mg/L的5-FU分别作用于低氧SGC7901细胞24、48和72 h, MTT法检测细胞活力; 用上述同样方式作用于低氧SGC7901细胞24、48和72 h后, Hoechst染色法检测细胞凋亡; TanⅡA(0、0.5、2.0、10.0 mg/L)联合10.0 mg/L的5-FU作用于低氧SGC7901细胞48 h后, 免疫细胞化学二步法检测HIF-1α及突变型P53的表达.
结果: 低氧环境下, 不同浓度的TanⅡA联合10.0 mg/L 5-FU呈时间、剂量依赖性地抑制SGC7901细胞的增殖(均P<0.01), 10.0 mg/L TanⅡA联合5-FU作用细胞72 h后, 其抑制率为67.46%. 0.5-10.0 mg/L TanⅡA联合5-FU作用细胞24、48、72 h, TanⅡA呈时间、剂量依赖性地促进SGC7901细胞凋亡(均P<0.01). HIF-1α及突变型P53表达明显高于常氧组(t = 22.786, 13.914, 均P<0.01), 不同浓度的TanⅡA联合10.0 mg/L 5-FU作用细胞48 h后, HIF-1α、突变型P53蛋白表达明显降低(F = 182.234, 130.062, 均P<0.01), 且二者呈高度正相关(n = 5, r = 0.995, P<0.01).
结论: 在低氧环境下, TanⅡA可能通过抑制HIF-1α及突变型P53蛋白表达从而增强5-FU抑制SGC7901细胞增殖及诱导凋亡作用.