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世界华人消化杂志. 2010-09-28; 18(27): 2846-2851
Published online 2010-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i27.2846
Published online 2010-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i27.2846
Pim-3基因表达下调及其对食管鳞癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响
王琛, 刘宇琼, 李惠翔, 郑州大学基础医学院病理教研室 河南省郑州市 450052
王琛, 河南大学淮河医院妇产科 河南省开封市 475000
刘宇琼, 李惠翔, 郑州大学第一附属医院病理科 河南省肿瘤病理重点实验室 河南省郑州市 450052
冯天平, 赵景志, 河南省军区医院病理科 河南省郑州市 450001
王琛, 住院医师, 主要从事消化系肿瘤研究.
作者贡献分布: 此课题李惠翔设计; 研究过程由王琛、冯天平、赵景志及刘宇琼操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由李惠翔提供; 数据分析由刘宇琼与李惠翔完成; 本论文写作由王琛、刘宇琼、冯天平、赵景志及李惠翔完成.
通讯作者: 李惠翔, 教授, 450052, 河南省郑州市建设东路1号, 郑州大学第一附属医院病理科. lslbljys@126.com
电话: 0371-66658175
收稿日期: 2010-04-30
修回日期: 2010-08-13
接受日期: 2010-08-17
在线出版日期: 2010-09-28
修回日期: 2010-08-13
接受日期: 2010-08-17
在线出版日期: 2010-09-28
Abstract
目的: 研究Pim-3基因的表达下调及其对食管鳞癌EC9706细胞增殖及凋亡的影响, 并探讨其可能的作用机制.
方法: 利用Pim-3 siRNA转染食管鳞癌EC9706细胞, 并利用RT-PCR和Western blot技术检测转染Pim-3 siRNA后食管鳞癌EC9706细胞中Pim-3的表达. 此外, 利用CCK-8试剂盒和流式细胞术分别研究下调Pim-3基因的表达对EC9706细胞增殖和凋亡的影响, 进一步利用RT-PCR和Western blot检测与增殖相关的P21基因, 与凋亡相关的Bcl-2、Bax基因的表达.
结果: 转染Pim-3后, Pim-3基因在食管鳞癌EC9706细胞中的表达明显下调(P<0.05). 与未处理组和对照siRNA组相比, Pim-3 siRNA组在转染24、48、72、96 h EC9706细胞的增殖均明显受到抑制(96 h: 0.878±0.061 vs 2.254±0.062, 2.219±0.064, 均P<0.05). 转染48 h后, Pim-3 siRNA组细胞早期凋亡率为19.70%±1.46%, 显著高于未处理组和对照siRNA组的早期凋亡率(5.35%±0.80%, 5.50%±0.61%, F = 195.692, P = 0.000). 此外, Pim-3表达的下调能引起P21和Bax基因表达的升高(均P<0.05), Bcl-2基因表达的下调(P<0.05).
结论: Pim-3可能在食管鳞癌EC9706细胞的增殖和凋亡中发挥重要作用.
Keywords: Pim-3基因; 小干扰RNA; 食管鳞癌EC9706细胞; 细胞增殖; 细胞凋亡