基础研究
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世界华人消化杂志. 2010-08-28; 18(24): 2528-2532
Published online 2010-08-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i24.2528
Sphk1对人结肠癌细胞株Lovo增殖与侵袭的影响及其作用机制
钟月圆, 黄杰安, 刘诗权, 覃蒙斌, 金卉
钟月圆, 黄杰安, 刘诗权, 覃蒙斌, 金卉, 广西医科大学第一附属医院消化内科 广西壮族自治区南宁市 530021
钟月圆, 广西医科大学2008级硕士研究生, 主要从事消化系疾病的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30760275; 广西科学基金资助项目, No. 0832008.
作者贡献分布: 黄杰安是该研究项目的负责人; 此课题由黄杰安与刘诗权设计; 研究过程由钟月圆、覃蒙斌及金卉操作完成; 本论文写作由钟月圆完成; 黄杰安与刘诗权对本次课题的完成给予指导.
通讯作者: 黄杰安, 教授, 530021, 广西壮族自治区南宁市, 广西医科大学第一附属医院消化内科. jh23229@gmail.com
收稿日期: 2010-04-27
修回日期: 2010-07-05
接受日期: 2010-07-21
在线出版日期: 2010-08-28
Abstract

目的: 研究Sphk1对结肠癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响并探讨其机制.

方法: 将人结肠癌Lovo细胞株分成Sphk1激活组, Sphk1抑制组, 空白对照组. 以佛波醇-12-豆蔻酸酯-13-乙酸酯(phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA)为Sphk1激活剂(终浓度为100 nmol/L), N, N-二甲基鞘胺醇(erythro-sphingosine N, N-Dimethyl, DMS)为Sphk1抑制剂(终浓度为50 mmol/L)处理Lovo细胞24 h后, 用MTT方法测定细胞的增殖活性, 用流式细胞术检测细胞凋亡, 用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力, 用Western blot测定细胞Sphk1、ERK1/2、p-ERK1/2、NF-kB p65蛋白水平的变化.

结果: PMA可以明显诱导Sphk1蛋白的表达, 促进Lovo细胞生长, 抑制细胞的凋亡, 并促进细胞的侵袭; 相反, DMS明显抑制Sphk1的表达, 抑制细胞生长, 促进细胞的凋亡, 并抑制细胞的侵袭. Sphk1激活组、对照组、抑制组的细胞凋亡率分别是9.15%, 16.25%, 32.58%. 与对照组相比, Sphk1激活组、抑制组的细胞相对侵袭率分别是190.57%, 9.65%, 差异有统计学意义(均P<0.01). PMA诱导Sphk1表达, 同时伴有ERK1/2、p-ERK1/2和NF-kB p65蛋白表达的上调, DMS抑制Sphk1表达, 可抑制ERK1/2、p-ERK1/2、NF-kB p65蛋白的表达.

结论: Sphk1可促进Lovo细胞的生长增殖与侵袭并抑制细胞的凋亡, 其机制可能与ERK1/2和NF-kB信号通路的激活有关.

Keywords: 鞘氨醇激酶-1; 人结肠癌细胞; 侵袭; 凋亡; 增殖