修回日期: 2009-12-10
接受日期: 2009-12-14
在线出版日期: 2010-01-18
目的: 探讨中药复方健脾解毒方对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的大鼠肝癌的预防作用及其调控miR-199a的表达机制.
方法: ♂Wistar大鼠, 随机分为正常组(n = 25)、模型组(n = 40)及中药预防组(n = 40). 除正常组外, 其他组在1-12 wk饮用含DEN 80 mg/L的饮水[mg/(kg•d)]以诱癌, 中药组同时给予含生药1.75 g/mL的健脾解毒方灌胃(10 mL/kg), 正常组给予10 mL/kg生理盐水灌胃, 每日1次, 共12 wk. 于4、8、12、16 wk时相点, 各组随机取5只大鼠处死取肝, 20 wk将剩余大鼠全部处死取肝, 观察肝脏外观, 计算死亡率和腹水生成率, 比较肝脾指数, 肝组织进行HE染色, 应用Real-time PCR检测肝组织miR-199a的表达.
结果: 在20 wk实验结束时, 正常大鼠无死亡, 而模型大鼠死亡率为42.5%(17/40), 预防组死亡率为17.5%(7/40), 16-20 wk时模型组腹水发生率为87.5%(7/8), 预防组为44.4%(8/18), 与模型组有差异性(P<0.05). 正常组没有肿瘤形成, 模型组和预防组在16 wk后成瘤率均为100%. 16 wk模型组肝癌Ⅲ级发生率为100%(5/5), 而预防组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肝癌发生率分别为40%(2/5)、40%(2/5)及20%(1/5), 两组比较有差异(P<0.05). 与模型组比较, 中药预防组有显著降低肝脾指数的作用(均P<0.01). PCR结果显示, 模型组肝组织miR-199a较正常组明显上调, 中药预防组除16 wk外均有显著下调miR-199a表达的作用(均P<0.01).
结论: 健脾解毒方有预防DEN诱导大鼠肝癌发生的作用, 其机制可能部分与下调miR-199a的表达有关.