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细胞周期依赖性蛋白激酶对体外培养人肝癌细胞侵袭力的影响
王开阳, 蒋星星, 李龙, 李慧珍, 傅华群, 南昌大学第二附属医院肝胆外科 江西省南昌市 330006
熊爱珍, 南昌大学第二附属医院药剂科 江西省南昌市 330006
王开阳, 2007级南昌大学医学院硕士, 主要从事肝胆外科基础与临床研究.
基金项目: 江西省卫生厅基金资助项目, No. 20091156.
作者贡献分布: 此课题在傅华群指导下由王开阳设计; 实验过程由王开阳与蒋星星共同完成; 熊爱珍为项目负责人, 指导实验; 数据分析由李龙与李慧珍完成; 本文撰写由王开阳与傅华群完成.
通讯作者: 傅华群, 教授, 330006, 江西省南昌市, 南昌大学第二附属医院肝胆外科. ncdxfhq@yahoo.com.cn
电话: 0791-6259631
收稿日期: 2009-10-11
修回日期: 2009-11-15
接受日期: 2009-11-16
在线出版日期: 2010-01-18
修回日期: 2009-11-15
接受日期: 2009-11-16
在线出版日期: 2010-01-18
Abstract
目的: 探讨CDKs对体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721侵袭力的影响及其分子机制.
方法: 将细胞分为A、B两组(A组用终浓度为0 μmol/L Roscovitine, B组用终浓度为32 μmol/L Roscovitine, 均培养24 h), 采用流式细胞术检测经CDKs特异性抑制剂Roscovitine干预后的人肝癌细胞SMMC-7721的细胞周期, 并用Transwell小室、划痕实验、PCR技术分别检测处于不同细胞周期下的人肝癌细胞侵袭能力、水平运动能力及uPA、MMP-9 mRNA表达.
结果: 经终浓度为32 μmol/L的Roscovitine干预24 h后的人肝癌细胞SMMC-7721处于G0/G1期细胞比例迅速升高(72.19%±0.47% vs 59.22%±0.54%, P<0.05), 细胞侵袭能力下降, 穿膜细胞数明显减(71.40±5.59 vs 149.60±16.36, P<0.05); 细胞水平运动能力明显下降(P<0.05); uPA mRNA的表达下降、但MMP-9 mRNA的表达却无明显变化.
结论: Roscovitine干预使人肝癌细胞SMMC-7721侵袭能力和水平运动能力下降, 其机制可能与肝癌细胞周期时相分布发生改变和uPA mRNA的表达下降有关.
Keywords: 细胞周期依赖性蛋白激酶; 细胞周期; 侵袭力; uPA; 肝癌细胞