Published online 2010-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i18.1902
修回日期: 2010-05-06
接受日期: 2010-05-18
在线出版日期: 2010-06-28
目的: 探讨microRNA-377(miR-377)与组蛋白甲基转移酶SMYD3在肝癌中的表达规律及与肝癌的相关性.
方法: 利用实时定量PCR分别检测不同肝组织及肝细胞系中miR-377表达水平, 应用实时定量PCR和Western blot分别检测不同肝组织及肝细胞系中SMYD3 mRNA和蛋白水平的表达情况. 通过转染miR-377模拟物上调其在肝癌细胞株HepG2中表达后, 应用实时定量PCR、Western blot分别检测转染前后HepG2中SMYD3 mRNA和蛋白表达的变化.
结果: MiR-377 mRNA在人肝癌旁组织和肝癌组织中的表达较正常肝脏明显降低(0.331±0.059, 0.139±0.064 vs 0.874±0.178, 均P<0.05); 在HepG2中的表达较L-02明显降低(0.145±0.021 vs 0.868±0.194, P<0.05). SMYD3 mRNA和蛋白质在人肝癌旁组织和肝癌组织中的表达较正常肝脏明显升高(mRNA: 3.836±0.137, 5.836±0.965 vs 1.235±0.332; 蛋白: 0.381±0.020, 0.484±0.030 vs 0.252±0.015; 均P<0.05). SMYD3 mRNA和蛋白质在肝癌细胞系HepG2中的表达较正常肝细胞系L-02明显升高(mRNA: 0.845±0.047 vs 0.348±0.134; 蛋白: 0.575±0.008 vs 0.259±0.007, 均P<0.05). 转染miRNA-377模拟物上调HepG2中miR-377表达后转染组SMYD3 mRNA和蛋白表达较空白组和阴性对照组均明显下降(mRNA: 0.125±0.010 vs 0.857±0.163, 0.779±0.167; 蛋白: 0.092±0.026 vs 0.347±0.040, 0.383±0.054, 均P<0.05).
结论: miRNA-377在肝癌中表达明显下调, 其靶基因SMYD3表达上调; 表达下调的miRNA-377丧失对SMYD3表达的抑制可能是肝癌发生的重要机制.