Published online 2010-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v18.i11.1104
修回日期: 2010-03-16
接受日期: 2010-03-23
在线出版日期: 2010-04-18
目的: 研究骨桥蛋白(OPN)及纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)的表达特征及其在肝纤维化时的变化.
方法: 采用二甲基亚硝胺制作大鼠肝纤维化模型. 大鼠肝脏常规HE和天狼猩红染色. 采用SABC法作免疫组织化学染色及Western blot检测OPN和PAI-1蛋白表达; RT-PCR法检测OPN基因表达; 检测结果采用计算机图像定量分析系统, 扫描并计算染色阳性区域面积和阳性比率或条带的吸光度值.
结果: 正常大鼠肝组织OPN和PAI-1表达极弱, 肝纤维化大鼠肝脏中OPN表达增强, 阳性信号散在或弥漫性分布, 主要见于小叶内中央静脉周围、纤维间隔内以及周围巨噬细胞胞质, 库普弗细胞, 门管区的部分肝细胞, 肝窦壁内皮细胞. PAI-1在肝纤维化大鼠肝组织汇管区、肝细胞变性坏死处, 肝窦周Disse间隙及毗邻以上部位的肝细胞, 组织纤维间隔处及其外周细胞亦见阳性染色. Western blot检测正常大鼠肝脏OPN的蛋白表达极低, 肝纤维化组OPN的蛋白表达较正常组显著增强(1.0907±0.2082 vs 0.0673±0.0663, P<0.01). 与正常组比, 肝纤维化组PAI-1表达也显著增强(1.1407±0.3094 vs 0.2464±0.2234, P<0.01). RT-PCR检测结果显示, 正常大鼠肝脏OPN mRNA表达极低, 肝纤维化大鼠肝脏OPN mRNA的表达明显增强(0.2128±0.0527 vs 0.1298±0.0316, P<0.05).
结论: OPN及PAI-1的表达与肝纤维化密切相关, 肝纤维化时大鼠肝组织OPN及PAI-1的表达水平显著增高, OPN可能会促进PAI-1的高表达, 从而抑制细胞外基质(ECM)降解、加速肝纤维化进程.