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紧密连接蛋白Occludin在非酒精性脂肪肝大鼠肠上皮细胞中的表达及其与TNF-α的关系
许腊梅, 孙丹莉, 张予蜀, 张振玉, 李晓翠, 南京医科大学附属南京第一医院消化科 江苏省南京市 210006
许腊梅, 2007级南京医科大学在读硕士, 主要从事肝脏疾病研究.
作者贡献分布: 许腊梅与孙丹莉对此文贡献均等; 此课题由孙丹莉、许腊梅、张予蜀及张振玉设计完成; 研究过程由许腊梅、孙丹莉、张予蜀、张振玉及李晓翠完成; 研究经费由孙丹莉提供; 数据分析由许腊梅完成; 论文写作由许腊梅与孙丹莉完成.
通讯作者: 孙丹莉, 主任医师, 210006, 江苏省南京市长乐路68号, 南京医科大学附属南京第一医院消化科. sundanli_nj@126.com
电话: 025-52271260
收稿日期: 2009-12-23
修回日期: 2010-02-10
接受日期: 2010-02-23
在线出版日期: 2010-04-08
修回日期: 2010-02-10
接受日期: 2010-02-23
在线出版日期: 2010-04-08
Abstract
目的: 研究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肠上皮细胞中紧密连接蛋白Occludin的表达及与肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系.
方法: 30只♂SD大鼠平均分为2组, 对照组普通饮食, 模型组给予高脂饮食, 喂养12 wk后处死. 模型组肝脏HE染色显示脂肪肝造模成功. 采用放免法检测血清TNF-α水平, 取肝脏组织行免疫组织化学检测TNF-α的表达, 取空肠组织应用免疫组织化学检测肠上皮细胞间紧密连接蛋白Occludin表达并电镜下观察肠上皮细胞间紧密连接部位的变化.
结果: 模型组血清TNF-α水平较对照组明显增高, 差异具有统计学意义(3.21 µg/L±0.45 µg/L vs 2.10 µg/L±0.29 µg/L, t = -6.157, P<0.01). 模型组大鼠肝脏TNF-α阳性物质主要分布在肝细胞的胞质, 呈棕黄色细颗粒状, 而对照组仅个别散在肝细胞阳性. 对照组Occludin蛋白主要沿大鼠空肠黏膜上皮细胞膜的顶端呈线状分布, 而模型组阳性染色较之明显减弱, 呈非连续性分布. 电镜下模型组紧密连接明显短于对照组, 具有显著性差异(0.50 µm±0.21 µm vs 0.78 µm±0.19 µm, P<0.05).
结论: TNF-α可能抑制了空肠上皮细胞中紧密连接蛋白Occludin的表达, 从而破坏了肠黏膜机械屏障, 促进NAFLD的发生及发展.
Keywords: 非酒精性脂肪性肝病; 肿瘤坏死因子α; Occludin; 免疫组织化学