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世界华人消化杂志. 2009-11-28; 17(33): 3381-3386
Published online 2009-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v17.i33.3381
Published online 2009-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v17.i33.3381
PI3K p55γ N末端氨基酸过表达对胃癌MGC803细胞迁移的影响
李珅, 郭红艳, 吴琦, 张梅, 高涵, 孙晓杰, 齐齐哈尔医学院生物化学教研室 黑龙江省齐齐哈尔市 161006
李珅, 2003年广西医科大学硕士, 主要从事分子生物学研究.
基金项目: 黑龙江省自然科学基金资助项目, No. ZA2006-04; 黑龙江省教育厅基金资助项目, No. 11531431.
作者贡献分布: 本课题由孙晓杰设计; 研究过程由李珅与郭红艳等操作完成; 数据采集、分析由李珅、吴琦、张梅及高涵完成; 本论文写作由李珅与郭红艳完成, 孙晓杰进行批评性审阅.
通讯作者: 孙晓杰, 教授, 161006, 黑龙江省齐齐哈尔市建华区卜奎北大街333号, 齐齐哈尔医学院生物化学教研室. sunxj97@yahoo.com.cn
电话: 0452-2663151
收稿日期: 2009-10-11
修回日期: 2009-11-09
接受日期: 2009-11-16
在线出版日期: 2009-11-28
修回日期: 2009-11-09
接受日期: 2009-11-16
在线出版日期: 2009-11-28
Abstract
目的: 观察p55γ N末端24个氨基酸的过表达对胃癌MGC803细胞迁移的影响.
方法: 通过脂质体介导用pEGFPN24和空载体pEGFPC1质粒进行基因转染, 建立稳定表达融合蛋白GFP-N24和GFP的细胞系; 通过细胞划痕实验和迁移实验观察GFP-N24的过表达对细胞运动迁移的影响; 明胶酶谱实验观察其对肿瘤转移相关基因MMP9表达和分泌的影响; 免疫印迹实验检测GFP-N24的过表达对PI3K-Akt信号通路活性的影响.
结果: 建立了稳定表达融合蛋白GFP-N24的MGC803/GFP-N24细胞系和表达GFP的MGC803/GFP细胞系. 细胞划痕实验和细胞迁移实验发现表达GFP-N24的MGC803细胞运动迁移能力下降(t = 0.003, P<0.01). GFP-N24通过减少磷酸化Akt的表达而抑制PI3K-Akt信号的活性, 但其对MMP9的表达和分泌没有影响.
结论: PI3K p55γ N末端24个氨基酸通过抑制PI3K-Akt信号通路的活性而抑制胃癌MGC803细胞的迁移, 其在胃癌的治疗上可能具有潜在的应用前景.
Keywords: 磷脂酰肌醇3-激酶; p55γ; 胃癌细胞; 迁移