基础研究
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世界华人消化杂志. 2009-10-18; 17(29): 2990-2995
Published online 2009-10-18. doi: 10.11569/wcjd.v17.i29.2990
马尾松花粉多糖硫酸酯对肝癌HepG2细胞的诱导分化
刘芳, 刘靓雯, 蔡云, 王丽娟, 耿越
刘芳, 菏泽市疾病预防控制中心 山东省菏泽市 274000
刘靓雯, 济南市传染病医院 山东省济南市 250021
蔡云, 王丽娟, 耿越, 山东师范大学生命科学学院动物抗性生物学省重点实验室 山东省济南市 250014
刘芳, 硕士, 主要从事免疫细胞生物学方向研究.
基金项目: 山东省自然科学基金资助项目, No. Y2008D13.
作者贡献分布: 刘芳与耿越对此文所作贡献均等; 此课题由刘芳与耿越设计; 研究过程由刘芳、刘靓雯、蔡云、王丽娟及耿越操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由耿越提供; 数据分析由刘芳、蔡云及王丽娟完成; 本论文写作由刘芳与耿越完成.
通讯作者: 耿越, 博士, 250014, 山东省济南市文化东路88号, 山东师范大学生命科学学院动物抗性生物学省重点实验室. gengy@sdnu.edu.cn
电话: 0531-86180196
收稿日期: 2009-07-25
修回日期: 2009-09-13
接受日期: 2009-09-21
在线出版日期: 2009-10-18
Abstract

目的: 观察马尾松花粉多糖硫酸酯(SPPM60)对人肝癌细胞株HepG2的诱导分化作用, 并对其机制进行初步探讨.

方法: MTT法检测HepG2细胞增殖活力; 倒置显微镜、HE染色及透射电镜观察细胞形态; 流式细胞技术检测细胞周期; 荧光分光光度计检测细胞内钙离子浓度的变化; 免疫细胞化学方法检测甲胎蛋白的表达, 溴甲酚绿法测定白蛋白含量; 重氮反应比色法测定γ-谷氨酰转肽酶活力, 比色法测定碱性磷酸酶活力, 考马斯亮蓝法测定总蛋白含量.

结果: 经SPPM60处理后, HepG2细胞的增殖受到抑制; 细胞形态趋于正常; 与对照组相比, SPPM60组G0/G1期细胞数增加(76.97%±0.91% vs 64.62%±0.18%, P<0.05), S期细胞数减少(17.21%±0.71% vs 24.26%±0.15%, P<0.05), G2/M细胞数减少(5.82%±0.20% vs 11.13%±0.34%, P<0.01); [Ca2+]i降低; 甲胎蛋白表达降低, 白蛋白分泌量上升(6.77±0.33 mg/106细胞 vs 4.87±0.30 mg/106细胞, P<0.05), γ-谷氨酰转肽酶与碱性磷酸酶活力降低(16.3±0.7 U/g vs 22.3±1.2 U/g; 223.3±15.7 U/g vs 311.1±13.4 U/g P<0.05或0.01), 胎盘型碱性磷酸酶的比例降低(46.4%±1.5% vs 62.5%±2.3%,P<0.05). PPM60组细胞没有明显变化.

结论: 硫酸酯化赋予了SPPM60抑制HepG2细胞的活性, 其作用机理可能是降低细胞内钙离子浓度, 阻滞细胞周期于G0/G1期, 诱导HepG2细胞分化逆转其恶性.

Keywords: 多糖硫酸酯; HepG2; 细胞增殖; 细胞分化